Anticorpo monoclonal de coelho Acetil-alfa Tubulina K40 (Q71U36) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cadeia Alfa-1A da Tubulina

• A tubulina é o principal componente dos microtúbulos, formando uma estrutura cilíndrica a partir de heterodímeros de alfa- e beta-tubulina associados lateralmente. Os microtúbulos crescem pela adição de dímeros ligados a GTP na extremidade positiva, onde se forma uma capa estabilizadora. Abaixo da capa, a hidrólise de GTP (EC 3.6.5.-) converte a tubulina para um estado ligado a GDP, tornando-a propensa à despolimerização. Essa instabilidade dinâmica é fundamental para a divisão celular, o transporte intracelular e a integridade estrutural. Referências relacionadas: UniProt Q71U36.

• A alfa-tubulina localiza-se predominantemente no citoplasma e no citoesqueleto. Ela também é um componente dos axonemas ciliares e flagelares, onde forma o núcleo microtubular essencial para a motilidade e a sinalização. Referências relacionadas: UniProt Q71U36.

• A expressão é particularmente elevada no tecido cerebral fetal, sugerindo um papel crítico no desenvolvimento neuronal precoce e na formação de axônios. Referências relacionadas: PMID:17584854.

• O anticorpo reconhece especificamente a alfa-tubulina acetilada na lisina 40 (K40). A acetilação nesse resíduo é um marcador de microtúbulos estáveis, especialmente em neurônios, cílios e flagelos. A alfa-tubulina também sofre outras modificações pós-traducionais, como polyglutamilação, fosforilação e nitrotirosina, que regulam a função e as interações dos microtúbulos. Referências relacionadas: PMID:24906155; PMID:32747782; PMID:10339593.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético ao redor do K40; portanto, espera-se que o anticorpo detecte a alfa-tubulina acetilada de forma preferencial em relação à forma não acetilada. Considere o uso de inibidores de acetilases ou tratamentos controle para validar os sinais específicos de acetilação.
• Para western blotting, é esperada uma banda principal em ~50 kDa. Use amostras frescas com inibidores de protease e evite múltiplos ciclos de congelamento-descongelamento para preservar as marcas de acetilação lábil.
• Na imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize a recuperação de antígeno e a fixação (por exemplo, paraformaldeído a 4%) para manter a disponibilidade do epítopo. Inclua controles de isotipo e controles sem anticorpo primário para confirmar a especificidade da coloração.
• Dada a alta expressão no cérebro fetal, tecido cerebral ou linhagens de células neuronais podem servir como controles positivos. A reatividade cruzada com camundongo e rato possibilita estudos translacionais e pré-clínicos.
• Para ELISA, faça a cobertura com peptídeo acetilado ou proteína recombinante para avaliar a ligação. Utilize peptídeo não acetilado como controle negativo para garantir a especificidade do epítopo.

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