Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H2A (K5) (P04908/P0C0S8) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2A

• A Histona H2A é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina. Isso limita a acessibilidade do DNA e desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica.
• A localização subcelular da H2A é principalmente o núcleo e o cromossomo.
• A Histona H2A está sujeita a extensas modificações pós-traducionais (PTMs) em sua caixa N-terminal, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação. Essas modificações constituem o "código de histonas" e regulam a dinâmica da cromatina.
• A acetilação na lisina 5 (H2AK5ac) é uma marca epigenética chave associada à transcrição ativa e à cromatina aberta. Este anticorpo é produzido contra um peptídeo acetilado sintético em torno de K5 e reconhece especificamente a forma acetilada.
• Múltiplos genes codificam variantes da H2A (por exemplo, H2AC4, H2AC8, H2AC11, H2AC15, H2AC16, H2AC17), que são altamente conservadas entre as espécies. A sequência do imunógeno é derivada da H2A humana e espera-se que apresente reatividade cruzada com ortólogos devido à alta homologia de sequência.

Referências relacionadas: UniProt P04908 e UniProt P0C0S8 anotam abrangentemente as funções e modificações da histona H2A.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético em torno de K5. Para confirmar a especificidade para a forma acetilada, considere usar o bloqueio com peptídeo não acetilado ou comparar sinais de células tratadas com inibidores de histona desacetilases (por exemplo, tricostatina A, butirato de sódio) versus controles não tratados.
• No western blot (WB), espera-se uma banda em aproximadamente 14 kDa para a Histona H2A. A intensidade do sinal dependerá do estado de acetilação da amostra.
• Para imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização. A fixação com metanol ou a permeabilização com Triton X-100 são tipicamente eficazes para alvos de histonas nucleares.
• Este anticorpo foi validado para ELISA e pode ser adequado para ensaios quantitativos quando emparelhado com padrões apropriados.
• A reatividade cruzada relatada inclui humano, camundongo e rato, com uma ampla gama de outras espécies prevista com base na homologia de sequência. Valide a reatividade em seu sistema de modelo específico se não tiver sido testado anteriormente.
• Como um anticorpo policlonal, podem ocorrer variações de lote para lote. Recomenda-se a titulação e otimização para cada aplicação e tipo de amostra.

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