Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H2B-K20 (P62807/Q16778) para WB, ELISA, ChIP

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2B

A Histona H2B é um componente central do nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Junto com as histonas H2A, H3 e H4, ela envolve e compacta o DNA, regulando assim a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares. A Histona H2B desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs), coletivamente conhecidas como código de histonas, que incluem acetilação, metilação, fosforilação e outras. As duas principais variantes humanas de H2B (SWISS P62807 e Q16778) compartilham sequências quase idênticas e são codificadas por diferentes clusters gênicos. Referências relacionadas: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

Além de suas funções nucleares, a Histona H2B exibe ampla atividade antibacteriana e pode contribuir para a barreira antimicrobiana do epitélio colônico e para a atividade bactericida do líquido amniótico.

A Histona H2B localiza-se predominantemente no núcleo e está fortemente associada aos cromossomos. É amplamente expressa em vários tecidos, refletindo seu papel fundamental na organização do genoma. Referências relacionadas: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

A acetilação na lisina 20 (K20) é uma PTM específica que pode influenciar a estrutura da cromatina e a expressão gênica. Estudos de espectrometria de massa identificaram inúmeros sítios de acetilação na H2B, incluindo K20 (reportado como K21 em alguns alinhamentos). Este anticorpo reconhece especificamente a forma acetilada de K20, permitindo o monitoramento preciso desta modificação na biologia da cromatina e na pesquisa epigenética. Referências relacionadas: PMID:16283522, PMID:16627869.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal foi produzido contra um peptídeo acetilado sintético correspondente à lisina 20 da Histona H2B humana. Espera-se que reconheça especificamente a H2B‑K20 acetilada em ensaios relevantes.
• Para Western blotting (WB), considere o uso de extratos nucleares ou lisados celulares totais de amostras humanas, de camundongo ou de rato. O peso molecular previsto é de aproximadamente 14 kDa. Uma diluição inicial recomendada deve ser determinada empiricamente e validada no sistema de amostra relevante.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Emparelhe com um anticorpo total anti-H2B apropriado para normalização. Valide a especificidade usando peptídeos competidores acetilados e não acetilados.
• Para imunoprecipitação da cromatina (ChIP), otimize as condições de reticulação e fragmentação da cromatina para o seu tipo celular. Inclua um anticorpo anti-Histona H3 ou total anti-H2B como controle positivo, e um controle de isotipo IgG para avaliar a ligação inespecífica.
• Aplicações adicionais podem ser possíveis; sempre use controles apropriados e valide o desempenho no seu contexto experimental.

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