Acetil-Histona H3-K18 (P68431/Q16695) mAb de coelho | Western Blot, ChIP, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central dos nucleossomos, servindo como elementos estruturais que envolvem e compactam o DNA na cromatina, limitando a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares. Isso desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: UniProt
• A Histona H3 localiza-se principalmente no núcleo e nos cromossomos.
• As caudas N-terminais das histonas sofrem extensas modificações pós-traducionais (PTMs), denominadas coletivamente de "código das histonas", que regulam a estrutura e função da cromatina. A acetilação de resíduos específicos de lisina, como a lisina 18 (K18), está associada à transcrição ativa e é reconhecida por proteínas que contêm bromodomínios. Referências relacionadas: PMID:16267050, PMID:16627869
• Os dois números de acesso SWISS representam variantes distintas da Histona H3: P68431 (H3.1 canônica) é amplamente expresso, enquanto Q16695 (H3.1t/H3.4) é específico do testículo. Ambos compartilham alta identidade de sequência, e o anticorpo produzido contra o peptídeo acetilado ao redor do K18 de P68431 pode fazer reação cruzada com outras variantes de H3 devido às sequências conservadas. Referências relacionadas: UniProt Q16695

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 15 kDa; otimize as quantidades de carregamento e a diluição do anticorpo com base nos níveis de expressão da histona na sua amostra.
• Para imunoprecipitação da cromatina (ChIP, ChIP-seq) e CUT&Tag, este anticorpo reconhece a Histona H3 acetilada endógena; inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, loci transcricionalmente ativos vs. silenciosos) para confirmar a especificidade.
• Ao usar para dot blot (DB) ou ELISA, considere o pareamento com um anticorpo H3 não modificado para normalizar os sinais.
• A reatividade cruzada é prevista para uma ampla faixa de espécies; valide a reatividade em outras espécies além de humano, camundongo e rato, se necessário.
• Todas as condições experimentais devem ser validadas no sistema de amostra relevante nas condições do seu laboratório.

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