Anticorpo monoclonal de coelho Acetil-Histona H3 (K23) (Q16695 / P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

Arquitetura da Cromatina e Estabilidade do Genoma: A histona H3 é um componente central do nucleossomo, fundamental para empacotar o DNA em cromatina. Desempenha papéis essenciais na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e na manutenção da estabilidade cromossômica. A remodelação dinâmica dos nucleossomos governa a acessibilidade do DNA à maquinaria transcricional e outros fatores. Referências relacionadas: UniProt Q16695/P68431

Localização Nuclear e Cromossômica: A histona H3 reside predominantemente no núcleo e se associa fortemente aos cromossomos durante todo o ciclo celular, sustentando suas funções estruturais e regulatórias. Referências relacionadas: UniProt Q16695/P68431

Diversidade de Isoformas: O genoma humano codifica múltiplas variantes da histona H3. Os identificadores SWISS Q16695 (H3.1t) e P68431 (H3.1 canônica) destacam isoformas expressas de forma tecido-específica e ubíqua, respectivamente. H3.1t é expressa especificamente em células testiculares, enquanto H3.1 está amplamente presente. Referências relacionadas: UniProt Q16695/P68431

Modificações Pós-Traducionais (MPTs): A histona H3 está sujeita a uma vasta gama de MPTs, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e citrulinação, que coletivamente formam o "código da histona". A acetilação na lisina 23 (H3K23ac) é uma modificação específica que modula a estrutura da cromatina e a expressão gênica, semelhante a outros sítios de acetilação bem caracterizados, como K19 e K24. Referências relacionadas: PMID:19608861

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Verificação de Especificidade: Como o imunógeno é um peptídeo acetilado ao redor de K23, espera-se que o anticorpo reconheça a histona H3 acetilada em K23 (H3K23ac). Inclua controles adequados, como bloqueio com peptídeo não acetilado ou tratamento com inibidores de desacetilase, para confirmar a especificidade.
• Preparação de Amostras: Para Western blotting, lisados enriquecidos em histonas (por exemplo, histonas extraídas com ácido) geralmente produzem sinais ótimos. Considere testar diferentes métodos de extração para avaliar a eficiência de detecção no seu sistema modelo específico.
• Reatividade Cruzada: O fornecedor indica ampla reatividade cruzada prevista (Humano, Camundongo, Rato, Outro), mas a validação independente na sua espécie alvo e tipo de amostra é recomendada.
• Configuração de ELISA: Ao desenvolver ensaios de ELISA, use o peptídeo H3K23 acetilado como padrão ou controle positivo. Emparelhe com um anticorpo de captura anti-histona H3 pan para formatos de ELISA sanduíche, se desejado.
• Imunofluorescência (IF/ICC): Otimize as etapas de fixação e permeabilização para manter a acessibilidade do epítopo. A co-coloração com um anticorpo anti-histona H3 total pode ajudar a confirmar a localização e a especificidade da coloração.
• Observação Geral: Todos os protocolos sugeridos são pontos de partida; a otimização empírica é essencial para alcançar o melhor desempenho no seu contexto experimental.

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