Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H3-K23 (Q16695/P68431) para WB, ChIP, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central dos nucleossomos, as unidades repetitivas fundamentais da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, restringindo o acesso às maquinarias celulares que requerem o DNA como modelo. Através deste papel estrutural, as histonas são centrais para a regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade é dinamicamente modulada por uma complexa variedade de modificações pós-traducionais (MPTs) coletivamente conhecidas como código de histonas, juntamente com a remodelação do nucleossomo.

A acetilação na lisina 23 (K23) da cauda N-terminal da histona H3 é uma MPT significativa que contribui para a descondensação da cromatina e ativação gênica. Este sítio corresponde a K24 em algumas numerações de sequência devido à clivagem da metionina iniciadora. Múltiplos estudos identificaram a acetilação de K23 em vários contextos celulares, ligando-a a estados de cromatina aberta e regulação transcricional.

Referências relacionadas: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16457588

A proteína Histona H3.1 (codificada por genes como H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 e HIST1H3A) está tipicamente localizada no núcleo e cromossomo. A isoforma específica do testículo H3.1t (Q16695) é expressa em células testiculares, enquanto a H3.1 canônica (P68431) é ubíqua. Ambas as variantes compartilham o sítio de acetilação K23 conservado.

A Histona H3 está sujeita a numerosas MPTs adicionais, incluindo metilação, fosforilação, citrulinização e outras acilações, que regulam intricadamente a função da cromatina. A especificidade do anticorpo para a forma acetilada de K23 permite a dissecção precisa desses mecanismos regulatórios.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é gerado contra um peptídeo sintético acetilado correspondente aos resíduos ao redor de K23 da Histona H3 humana. A reatividade cruzada é prevista em uma ampla gama de espécies devido à conservação da sequência desta região; sempre confirme com suas próprias amostras.
• Para Western blot (WB), uma banda em torno de 15 kDa é esperada. Considere carregar controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, células tratadas com inibidores de histona desacetilase vs. não tratadas) para verificar o sinal dependente de acetilação.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), a otimização da recuperação antigênica e do bloqueio pode ser necessária; valide a especificidade usando competição com peptídeo ou linhagens celulares knockout, se disponíveis.
• Para imunoprecipitação da cromatina (ChIP), garanta a ligação cruzada e o cisalhamento adequados. Inclua um controle de IgG não específica e teste diferentes concentrações de anticorpo. Este anticorpo é adequado para ChIP conforme indicado pelo fornecedor.
• Aplicações como ELISA e outras devem ser validadas no sistema de amostra relevante. A sensibilidade e a especificidade podem variar entre os ensaios.
• Como com qualquer anticorpo específico para modificação de sítio, a consistência entre lotes pode afetar os resultados; sempre faça titulação e confirme a diluição de trabalho ideal.

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