Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Histona H3-K27 Acetilada (Q16695 / P68431) para WB, IHC-P, ChIP

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, que enrola e compacta o DNA em cromatina, regulando assim a acessibilidade do DNA à maquinaria celular. As histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) nas histonas, coletivamente conhecido como código de histonas, controla dinamicamente a estrutura e função da cromatina.
Referências relacionadas:
PMID:16627869
PMID:17194708

A Histona H3 possui várias variantes; H3.1 (codificada por genes como H3C1-H3C12, UniProt P68431) é a forma canônica dependente de replicação expressa durante todo o ciclo celular, enquanto H3.1t (H3-4, UniProt Q16695) é uma variante específica do testículo. Ambas se localizam no núcleo e são partes integrais dos cromossomos.
Referências relacionadas:
UniProt Q16695
UniProt P68431

A acetilação na lisina 27 da histona H3 (H3K27ac) é uma marca bem caracterizada de intensificadores (enhancers) e promotores ativos, distinguindo-os de elementos regulatórios em preparação ou inativos. Esta modificação, catalisada por acetiltransferases de histonas como p300/CBP, promove uma conformação de cromatina aberta e facilita a ativação transcricional. A desregulação da acetilação H3K27 tem sido implicada no câncer e outras doenças.
Referências relacionadas:
PMID:16627869
PMID:17194708

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Ao detectar acetilação, inclua inibidores de desacetilases (por exemplo, butirato de sódio, TSA) nos tampões de lise para preservar os níveis endógenos de acetilação.
• Use lisados celulares totais de HeLa, HEK293 ou outras linhagens celulares apropriadas como controles positivos; amostras induzidas ou tratadas podem apresentar sinal de H3K27ac aumentado.
• Para ensaios de ChIP, certifique-se de que o anticorpo enriqueça especificamente a cromatina marcada com H3K27ac; considere as condições de reticulação e a otimização da sonicação.
• Confirme a especificidade do anticorpo usando um experimento de bloqueio com peptídeo acetilado ou comparando os sinais com um anticorpo pan-H3.
• Este anticorpo é adequado para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, DB e ChIP; valide o desempenho no sistema de amostra relevante para cada aplicação.

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