Anticorpo Monoclonal de Coelho Acetil-Histona H3-K27 (Q16695/P68431) para WB, ChIP, IF, IHC

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3 (H3.1/H3.1t)

• A histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental de repetição da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, regulando assim o acesso ao material genético para transcrição, replicação de DNA, reparo e recombinação. Esta arquitetura é essencial para a estabilidade cromossômica e a função celular adequada. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431.

• Em humanos, existem múltiplas variantes não alélicas da histona H3, incluindo as proteínas canônicas dependentes de replicação H3.1 (codificadas por genes como H3C1, H3C2, etc., GeneIDs: 8350, 8290) e a variante específica de testículo H3.1t (codificada por H3-4, também conhecida como H3FT, HIST3H3). A H3.1 canônica é expressa de forma onipresente, enquanto a expressão de H3.1t é restrita às células testiculares. Referências relacionadas: UniProt Q16695 (especificidade tecidual).

• Tanto H3.1 quanto H3.1t se localizam no núcleo e se associam aos cromossomos. Elas contêm um domínio de dobra de histona que media sua incorporação nos nucleossomos e uma cauda N-terminal que se projeta do nucleossomo, servindo como plataforma para uma miríade de modificações pós-traducionais (PTMs). Referências relacionadas: UniProt P68431.

• A cauda N-terminal da histona H3 está sujeita a PTMs extensas, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e outras, conhecidas coletivamente como o "código das histonas". Essas modificações orquestram a dinâmica da cromatina e os padrões de expressão gênica. A acetilação de resíduos de lisina, como na posição 27 (K27), é uma marca registrada de regiões de cromatina ativa, incluindo intensificadores e promotores, facilitando uma configuração de cromatina aberta que promove a ativação gênica. Referências relacionadas: UniProt P68431 (visão geral de PTM).

• O anticor aqui descrito foi gerado contra um peptídeo sintético correspondente à lisina 27 acetilada da histona H3 humana (isoforma H3.1, NP_003520.1). Ele reconhece especificamente a forma acetilada e é adequado para detectar esta modificação em uma variedade de aplicações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando um imunógeno peptídico acetilado sintético; considere que ele pode reconhecer o epítopo em conformações linear (desnaturada) e nativa, tornando-o adequado para aplicações como Western blot (WB), imunoprecipitação e ensaios baseados em cromatina.
• Para WB, o peso molecular previsto da histona H3 é de ~15 kDa. No entanto, as histonas podem migrar de forma anormal dependendo das condições do gel; inclua controles positivos apropriados (por exemplo, lisado total de células HeLa) e marcadores de peso molecular.
• Em aplicações de imunoprecipitação de cromatina (ChIP) e CUT&Tag, confirme a especificidade e eficiência do anticorpo realizando ensaios de competição com peptídeos e incluindo locos alvo conhecidos (por exemplo, intensificadores ativos marcados por H3K27ac) como controles positivos.
• Devido à ampla reatividade cruzada prevista (Humano, Camundongo, Rato e outros), este anticorpo pode ser adequado para várias espécies, mas a validação no sistema de amostra específico é recomendada.
• Para imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), a acessibilidade do epítopo pode ser influenciada por protocolos de fixação e permeabilização; a otimização dessas etapas é aconselhada.
• O desempenho do anticorpo em ELISA e dot blot (DB) pode ser avaliado usando peptídeos acetilados versus não acetilados para avaliar a especificidade.

CamelBio: Sua Ponte de Abastecimento Completa

A CamelBio é uma parceira dedicada de abastecimento de matérias-primas para IVD, fornecendo aos fabricantes de diagnósticos, laboratórios e institutos de pesquisa acesso perfeito a um portfólio abrangente de anticorpos, antígenos e reagentes auxiliares. No campo de pesquisa de epigenética e modificação de histonas, a CamelBio oferece anticorpos específicos para acetilação validados, pares de anticorpos monoclonais e policlonais otimizados e reagentes auxiliares a granel para apoiar suas necessidades de desenvolvimento de ensaios. Desde o abastecimento de rotina até a aquisição de matérias-primas para alvos raros, nossa plataforma capacita seu projeto do conceito à clínica com uma cadeia de suprimentos simplificada e confiável.