Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H3 (K36) (Q16695/P68431) para WB e ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossoma, enrolando e compactando o ADN em cromatina, desempenhando assim um papel central na regulação da transcrição, reparo do ADN, replicação do ADN e estabilidade cromossómica. A acessibilidade do ADN é regulada dinamicamente por modificações pós-traducionais (PTMs), comummente referidas como o "código das histonas". Referências relacionadas: UniProtKB P68431

A acetilação na lisina 36 (K36, correspondente à posição 37 na proteína H3 madura) é uma modificação bem caracterizada associada à cromatina ativamente transcrita. Esta marca de acetilação é depositada dinamicamente por acetiltransferases de histonas e removida por desacetilases, contribuindo para a regulação da expressão génica e da estrutura da cromatina. Referências relacionadas: PMID:17189264, PMID:17194708

A histona H3.1 canónica (codificada por múltiplos genes como H3C1–H3C12) é expressa ubiquitariamente, enquanto a variante específica do testículo H3.1t (H3-4) está restrita às células testiculares. O anticorpo reconhece o K36 acetilado em múltiplas variantes de H3 devido à conservação da sequência em redor do local de modificação. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695

A localização subcelular da histona H3 é nuclear, estreitamente associada ao ADN cromossómico durante todo o ciclo celular. A histona H3 fosforilada é um marcador amplamente utilizado da condensação cromossómica durante a mitose. Referências relacionadas: UniProtKB P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo acetilado sintético que abrange o K36 da histona H3 humana. Para confirmar a especificidade do anticorpo, considere realizar ensaios de bloqueio de peptídeos usando o peptídeo acetilado versus o não acetilado.
• Em aplicações de Western blot (WB), valide o anticorpo em sistemas de amostras relevantes (por exemplo, lisados celulares totais de HeLa) e use controlos adequados, como histonas extraídas de células tratadas com inibidores de HDAC para enriquecer a acetilação.
• Para ELISA, o peptídeo acetilado pode ser usado como antigénio de revestimento; a atividade deve ser verificada contra o peptídeo não modificado para garantir a ligação específica à modificação.
• Este anticorpo mostra ampla reatividade cruzada de espécies (Humano, Rato, Rato e faixa ampla prevista), mas é aconselhável verificar inicialmente a reatividade na espécie específica e no tecido de interesse.
• Devido à natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorizada; inclua um padrão de controlo positivo em cada experimento.

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