Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H3-K4 (Q16695/P68431) para WB, IP, IHC, ChIP, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental repetitiva da cromatina. Junto com as histonas H2A, H2B e H4, ela forma um octâmero ao redor do qual ~147 pb de DNA são enrolados, facilitando a compactação e organização do DNA dentro do núcleo. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Os nucleossomos regulam a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares, desempenhando, portanto, um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica. Esta função regulatória é mediada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) nas histonas, coletivamente referidas como o "código das histonas". Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

A acetilação é uma das PTMs mais extensivamente estudadas e geralmente está associada a um estado de cromatina aberto e transcricionalmente ativo. A acetilação de resíduos específicos de lisina, incluindo a lisina 4 (H3K4ac), desempenha um papel crítico na regulação epigenética e na expressão gênica. Referências relacionadas: UniProt P68431 (anotações de acetilação)

Múltiplas formas variantes da histona H3 existem em mamíferos. A H3.1 canônica (codificada por múltiplos genes, como aqueles sob o número de acesso P68431) é expressa durante todo o ciclo celular, enquanto a variante H3.1t (número de acesso Q16695) é expressa em células testiculares. O epítopo para este anticorpo reside em uma região da cauda N-terminal altamente conservada, permitindo ampla reatividade cruzada entre espécies. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

A histona H3 é localizada no núcleo e está estritamente associada ao DNA cromossômico. Sua presença em regiões ativamente transcritas e em elementos reguladores sublinha a importância de estudar modificações específicas de sítio, como a acetilação H3K4. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético circundando a lisina 4 da histona H3 humana, desenhado para reconhecer especificamente a forma acetilada de H3K4.
• As aplicações recomendadas incluem Western blot (detectando uma banda em ~15 kDa), imunoprecipitação, imunofluorescência/ICC, imunohistoquímica (parafina), dot blot, imunoprecipitação de cromatina e ELISA.
• Para ChIP, considere otimizar as condições de reticulação e sonicação; a especificidade do anticorpo para o epítopo acetilado o torna adequado para capturar regiões de cromatina ativamente transcritas.
• Ao usar para IP ou IF, valide o anticorpo em seu sistema de amostra específico e inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, tratamento com inibidores de desacetilases de histonas para aumentar os níveis de acetilação).
• Devido à alta conservação entre espécies, espera-se reatividade cruzada com humano, camundongo, rato e outras espécies (faixa ampla prevista); verifique em espécies não típicas, se necessário.
• Para aplicações críticas, a pré-adsorção com peptídeo não acetilado pode ser considerada para confirmar a especificidade.

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