Anticorpo policlonal de coelho para Acetil-Histona H3 (K4/K9/K14/K18/K23/K27) (Q16695 / P68431) para WB, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Acetil-Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Os nucleossomos enrolam e compactam o DNA, regulando assim o acesso ao material genético. Esse empacotamento dinâmico desempenha um papel central na transcrição, replicação do DNA, reparo e estabilidade cromossômica.

Referências relacionadas: UniProt Q16695 / P68431

As modificações pós-traducionais das histonas, particularmente a acetilação de resíduos específicos de lisina na extremidade N-terminal, formam uma parte crítica do "código de histonas" que governa a estrutura e a função da cromatina. A acetilação nos resíduos K4, K9, K14, K18, K23 e K27 da Histona H3 está associada à ativação transcricional, pois neutraliza a carga positiva das lisinas, enfraquecendo as interações histona-DNA e promovendo uma conformação de cromatina aberta. Essas modificações são marcadas por histona acetiltransferases (HATs) e apagadas por histona desacetilases (HDACs), e servem como locais de ancoragem para várias proteínas efetoras.

Referências relacionadas: Acetilação K4 (K5): PMID:17194708, Acetilação K9 (K10): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilação K14 (K15): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilação K18 (K19): PMID:16267050, PMID:16627869, Acetilação K23 (K24): PMID:16267050, PMID:16457588, Acetilação K27 (K28): PMID:16627869, PMID:17194708

A Histona H3 está predominantemente localizada no núcleo, onde se associa ao DNA cromossômico. A variante canônica H3.1 (P68431) é expressa na maioria das células somáticas, enquanto a variante tecido-específica H3.1t (Q16695) é restrita às células testiculares. A ampla reatividade cruzada prevista do anticorpo cobre ambas as variantes.

Referências relacionadas: Localização subcelular: UniProt Q16695 / P68431, Especificidade tecidual: Q16695

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno era um peptídeo acetilado sintético contendo as modificações K4 e K27; o anticorpo pode reconhecer preferencialmente esses epítopos, mas é possível o reconhecimento mais amplo de lisinas acetiladas de forma similar. Considere validar a especificidade usando controles de peptídeo mutante ou não modificado.
• Para Western blot, recomenda-se o uso de histonas extraídas com ácido ou extratos nucleares para enriquecer o alvo; o tamanho esperado da banda é de aproximadamente 15 kDa.
• No ELISA, a cobertura com peptídeos acetilados ou preparações de histonas nativas pode ajudar a confirmar a reatividade; titre o anticorpo e o sistema de detecção para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• A Histona H3 é altamente conservada entre as espécies; prevê-se que o anticorpo reaja com uma ampla gama de organismos, mas é recomendada a validação no sistema de amostras do usuário.
• Para manter a estabilidade, alíquota e armazene a -20°C ou -80°C após a reconstituição, evitando ciclos repetidos de congelamento-descongelamento.

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