Anticorpo Monoclonal de Coelho Acetyl-Histone H3-K56 (Q16695 / P68431) para ChIP, WB, IF

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental repetitiva da cromatina. Junto com as histonas H2A, H2B e H4, ela forma um octâmero ao redor do qual o DNA é enrolado, compactando o genoma e regulando o acesso para transcrição, replicação e reparo. Esta arquitetura é a base da estabilidade cromossômica e do controle dinâmico da expressão gênica.

Referências relacionadas:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• A Histona H3 está sujeita a uma ampla gama de modificações pós-traducionais (PTMs), frequentemente denominadas "código das histonas". Estas incluem acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e muitas outras, que coletivamente modulam a estrutura da cromatina e o recrutamento de proteínas efetoras. A acetilação na lisina 56 (K56) é uma marca notável implicada na montagem do nucleossomo, resposta a danos no DNA e regulação transcricional.

Referências relacionadas:

• PMID:17194708

• PMID:19608861

• A Histona H3 localiza-se exclusivamente no núcleo e associa-se aos cromossomos durante a divisão celular. A variante canônica H3.1 (codificada por múltiplos genes incluindo HIST1H3A, SWISS P68431) é expressa de forma dependente de replicação ao longo do ciclo celular, enquanto a variante H3.1t (Q16695) é específica do testículo e contribui para a organização da cromatina em células germinativas masculinas.

Referências relacionadas:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• Os anticorpos contra K56 acetilada são ferramentas valiosas para investigar a montagem da cromatina acoplada à replicação do DNA, vias de estresse genotóxico e a dinâmica da herança epigenética. O imunógeno específico para acetila usado para gerar este anticorpo garante alta seletividade para a forma modificada em relação à H3 não modificada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à K56 acetilada da Histona H3 humana. Este design deve conferir alta especificidade; no entanto, os pesquisadores podem considerar verificar a seletividade comparando os sinais entre controles bloqueados com peptídeo acetilado e não acetilado em seus sistemas experimentais.
• O anticorpo é recomendado para uma ampla gama de aplicações, incluindo ChIP-seq, CUT&Tag e IF. Para ensaios baseados em cromatina, otimize as condições de reticulação e sonicação para preservar o epítopo de acetilação K56. Na imunofluorescência, espera-se um padrão de coloração nuclear.
• O peso previsto da proteína é de 15 kDa. Ao realizar WB, inclua marcadores de peso molecular apropriados e considere o uso de um protocolo de extração de histonas para enriquecer proteínas nucleares.
• Embora a reatividade cruzada seja prevista para uma ampla gama de espécies, é aconselhável validar o desempenho em amostras não humanas por alinhamento de sequência ao redor do sítio de acetilação ou por testes no material biológico relevante.

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