Anticorpo Policlonal de Coelho para Acetil-Histona H3 K9 (Q16695/P68431) - WB IP IF IHC ChIP ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, regulando assim a acessibilidade à maquinaria transcricional. As histonas, incluindo a H3, desempenham papéis centrais na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada dinamicamente por uma variedade de modificações pós-traducionais (MPTs) nas histonas, conhecidas coletivamente como o "código das histonas", e pela remodelação dos nucleossomos.

A Histona H3 se localiza no núcleo e nos cromossomos. Existem duas isoformas principais em humanos: a histona H3.1 canônica dependente da replicação (codificada por vários genes como H3C1/HIST1H3A, H3C2/HIST1H3B, etc., UniProt: P68431) e a histona H3.1t independente da replicação, específica do testículo (codificada por H3-4/HIST3H3, UniProt: Q16695). Enquanto a H3.1 é amplamente expressa, a expressão da H3.1t está restrita às células testiculares.

Uma marca característica da histona H3 é sua extensa variedade de MPTs, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação e outras. A acetilação na lisina 9 (K9) da H3 é uma marca epigenética bem caracterizada, geralmente associada à eucromatina transcricionalmente ativa e regiões de cromatina aberta. Essa modificação é regulada dinamicamente por histona acetiltransferases (HATs) e desacetilases (HDACs), contribuindo para a regulação gênica, controle do ciclo celular e desenvolvimento. A acetilação em várias outras resíduos de lisina na H3 foi verificada experimentalmente e compartilha papéis regulatórios semelhantes.

Referências relacionadas: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:16185088

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 1-100 da Histona H3 humana, o que pode levar ao reconhecimento de múltiplas variantes de H3. Considere verificar a especificidade para a isoforma alvo no seu sistema de amostra.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 15 kDa. Protocolos de extração de histonas e controles de carregamento adequados são recomendados para resultados ideais.
• Para aplicações de IP e ChIP, valide o anticorpo nas suas condições específicas. No ChIP-seq, inclua controles de DNA de entrada e IgG não específico, e otimize a reticulação se necessário.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), os métodos de fixação e permeabilização podem influenciar a acessibilidade do epítopo; teste protocolos diferentes para obter a melhor relação sinal-ruído.
• O anticorpo tem ampla reatividade cruzada prevista (humano, camundongo, rato e outros), mas sempre confirme o desempenho na sua configuração experimental.

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