mAb de Coelho contra Acetil-Histona H3-K9 (Q16695/P68431) para Pesquisa em Epigenética e Aplicações de ChIP

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, onde auxilia no enrolamento e compactação do DNA em cromatina. Esse papel estrutural é fundamental para a regulação da acessibilidade do DNA à maquinaria celular envolvida na transcrição, reparo do DNA, replicação e estabilidade cromossômica.
  Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• Modificações pós-traducionais (PTMs) da histona H3, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação e outras, constituem um "código de histona" dinâmico que modula a estrutura da cromatina e a expressão gênica.
  Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• A acetilação ocorre em vários resíduos de lisina, como K5, K10, K15, K19, K24, K28 e K37, entre outros. Este anticorpo reconhece especificamente a lisina 9 acetilada (K9) da histona H3. Embora a acetilação de K9 não esteja explicitamente anotada nos registros UniProt para Q16695 e P68431, trata-se de uma modificação conhecida associada a regiões de cromatina ativa.
  Referências relacionadas: Para evidências de acetilação de histonas, consulte PMID:16185088 (acetilação de K10), PMID:16267050 (vários sítios de acetilação)

• A Histona H3 se localiza no núcleo e é uma proteína cromossômica majoritária.
  Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• Várias cópias gênicas codificam as proteínas da Histona H3. Q16695 (H3-4, HIST3H3) corresponde à variante H3.1t específica de testículo, expressa predominantemente nas células testiculares. P68431 representa a isoforma H3.1 amplamente expressa, codificada por vários genes como H3C1 (HIST1H3A) e H3C2 (HIST1H3B).
  Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético correspondente à região ao redor da posição K9 da Histona H3 humana. Esse design garante alta especificidade para a forma acetilada; considere incluir controles com peptídeo não acetilado em seus experimentos para confirmar a especificidade.
• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 15 kDa. Use controles de carregamento adequados e verifique a expressão no sistema de sua amostra, pois os níveis de Histona H3 podem variar entre tipos celulares e condições.
• Este anticorpo é adequado para uma ampla gama de aplicações, incluindo ChIP-seq e CUT&Tag. Para ensaios baseados em cromatina, recomenda-se a otimização das condições de ligação cruzada e imunoprecipitação, especialmente entre diferentes espécies e tipos de tecido.
• Em imuno-histoquímica ou imunofluorescência, garanta permeabilização e recuperação de antígeno adequadas, pois as histonas são proteínas nucleares. Valide os padrões de coloração usando controles positivos e negativos conhecidos.

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