Anticorpo Monoclonal de Coelho para Acetil-Histona H3 (Lys4) para WB, ChIP, IF | Q16695/P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina. Isso limita a acessibilidade do DNA às máquinas celulares que requerem o DNA como modelo, desempenhando assim um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• A acessibilidade do DNA é governada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (MPTs) nas histonas, coletivamente denominado "código das histonas", e pela remodelação do nucleossomo. Essas MPTs incluem acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação, ADP-ribosilação e várias acilações. Referências relacionadas: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:17194708

• A Histona H3 localiza-se principalmente no núcleo e está associada aos cromossomos durante todo o ciclo celular. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• Enquanto a Histona H3.1 canônica (codificada por múltiplos genes, por exemplo, HIST1H3A) é amplamente expressa, a variante H3.1t (H3-4, HIST3H3) é expressa especificamente nas células testiculares, sugerindo papéis especializados na organização da cromatina durante a espermatogênese. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695

• A acetilação da lisina 4 na histona H3 (H3K4ac) é uma modificação bem caracterizada associada a promotores ativos e cromatina aberta. Ela frequentemente coexiste com outras marcas ativadoras e é lida por proteínas contendo bromodomínio para facilitar a ativação transcricional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético correspondente aos resíduos ao redor de K4 da Histona H3 humana. Devido à alta conservação da cauda N-terminal entre as espécies, a reação cruzada com amostras de camundongo e rato é prevista; no entanto, é aconselhável verificar o desempenho no modelo experimental específico.

• Para ensaios de ChIP, considere validar a especificidade do anticorpo com peptídeos competidores acetilados e não acetilados para confirmar o enriquecimento nos loci alvo.

• No Western blotting, a Histona H3 migra em aproximadamente 15 kDa. Otimize a porcentagem do gel e as condições de transferência para proteínas de baixo peso molecular; lisados de proteínas extraídos do núcleo ou por ácido são recomendados para sinal enriquecido.

• Para imunofluorescência, teste diferentes protocolos de fixação (por exemplo, 4% PFA vs metanol) e permeabilização, pois estes podem influenciar a acessibilidade do epítopo e o nível de ruído de fundo.

• Dada a ampla gama de modificações no N-terminal da H3, certifique-se de que a detecção não seja afetada por MPTs vizinhas usando controles apropriados e, se possível, histonas mutantes ou proteínas recombinantes.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento One-Stop

A CamelBio fornece a fabricantes de diagnósticos, laboratórios de pesquisa e instituições acadêmicas acesso eficiente e one-stop a matérias-primas premium para IVD. Nosso portfólio abrange pares de anticorpos validados e anticorpos monoclonais/policlonais otimizados para alvos epigenéticos críticos como a acetil-Histona H3-K4, além de reagentes auxiliares a granel e fornecimento personalizado para matérias-primas raras ou de difícil obtenção. Se você precisa fazer a transição do conceito para a clínica ou escalar o desenvolvimento do seu ensaio, nós conectamos você a soluções de fornecimento confiáveis adaptadas ao seu fluxo de trabalho.