Acetyl-Histone H4-K12 Rabbit mAb (P62805) para ChIP, WB e IHC-P | CamelBio

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é uma das quatro proteínas histonas principais que formam o nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Junto com as histonas H2A, H2B e H3, ela envolve e compacta o DNA, regulando assim o acesso ao material genético. Essa compactação é essencial para a segregação cromossômica adequada durante a divisão celular e para a organização espacial do genoma dentro do núcleo. A histona H4 desempenha um papel central em processos dependentes de DNA, como transcrição, replicação e reparo, controlando a acessibilidade do DNA por meio de uma matriz complexa de modificações pós-traducionais, conhecida coletivamente como código de histonas.
Referências relacionadas: UniProt P62805

A cauda N-terminal da histona H4 está sujeita a extensas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e outras. A acetilação na lisina 12 (H4K12ac; correspondente ao resíduo 13 da proteína madura) é uma marca de histona bem caracterizada associada à cromatina transcricionalmente ativa e é reconhecida por várias proteínas contendo domínio bromo. Essa modificação é regulada dinamicamente por acetiltransferases de histonas (HATs) e desacetilases (HDACs), e sua presença em loci genômicos específicos correlaciona-se com a ativação gênica e estados de cromatina aberta.
Referências relacionadas: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735

A histona H4 é predominantemente localizada no núcleo e está estritamente associada ao DNA cromossômico. Em certos contextos, como durante a espermatogênese, a histona H4 acetilada torna-se enriquecida no núcleo de espermátides em alongamento, sugerindo um papel na remodelagem da cromatina durante o desenvolvimento de células germinativas. A proteína é expressa de forma onipresente nos tecidos, refletindo seu papel fundamental na estrutura da cromatina.
Referências relacionadas: UniProt P62805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para experimentos de imunoprecipitação de cromatina (ChIP), considere otimizar o tempo de reticulação e as condições de sonicação para fragmentar a cromatina para uma faixa de tamanho de 200–500 pb, uma vez que as interações histona–DNA são robustas.
• Ao realizar o "western blotting", o enriquecimento de histonas por extração ácida ou kits de purificação de histonas pode melhorar o sinal. Mantenha as amostras no gelo e adicione inibidores apropriados de desacetilases de histonas se os níveis de acetilação precisarem ser preservados.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada ampla prevista entre espécies devido à sequência altamente conservada da histona H4. Valide o anticorpo no sistema de espécie e tecido de interesse, pois os padrões de acetilação podem variar.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno com tampão citrato e a otimização cuidadosa da concentração do anticorpo são recomendadas para alcançar uma coloração nuclear específica.
• O formato monoclonal de coelho fornece desempenho consistente entre lotes e alta especificidade, tornando-o adequado para comparações multi-amostras e ensaios quantitativos.

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