Anticorpo Monoclonal de Coelho Acetil-Histona H4-K16 (P62805) para Aplicações WB, ChIP e IHC-P

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

• Componente central do nucleossomo: A Histona H4 é um bloco de construção fundamental do nucleossomo, a unidade básica repetitiva da cromatina. Ela envolve a compacta o DNA, regulando assim o acesso ao material genético e desempenhando um papel central na transcrição, reparo de DNA, replicação e estabilidade cromossômica. O estado dinâmico da cromatina é governado por uma complexa série de modificações pós-traducionais (o "código de histonas") e remodelagem de nucleossomos. Referências relacionadas: UniProt P62805

• Localização subcelular: A Histona H4 é predominantemente localizada no núcleo e é um constituinte majoritário dos cromossomos. Formas acetiladas, como as que envolvem K16, são encontradas em contextos nucleares específicos, incluindo os núcleos de espermátides em alongamento. Referências relacionadas: UniProt P62805

• Modificações pós-traducionais e acetilação K16: A Histona H4 é fortemente modificada, especialmente nos resíduos de lisina. A acetilação na lisina 16 (K16, correspondente à posição 17 na sequência processada da UniProt) é uma marca epigenética crítica. Esta modificação está associada à cromatina aberta e a regiões transricionalmente ativas. É regulada dinamicamente por acetiltransferases de histonas (HATs) e desacetilases (HDACs), e é reconhecida por proteínas contendo domínio bromo para modular a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é um peptídeo acetilado sintético em torno de K16 da Histona H4 humana, garantindo especificidade para a forma acetilada. Inclua sempre controles apropriados (por exemplo, competição com peptídeo não acetilado ou anticorpo total de Histona H4) para confirmar a especificidade em seu sistema experimental.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda única em aproximadamente 11 kDa. Considere otimizar as quantidades de carregamento e as condições de bloqueio para reduzir a ligação inespecífica.
• Na imunoprecipitação de cromatina (ChIP), as condições de reticulação e cisalhamento da cromatina devem ser cuidadosamente otimizadas. O anticorpo pode ser adequado para ChIP nativo e reticulado; valide a recuperação de regiões genômicas conhecidas acetiladas em K16.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), os métodos de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo precisarão de determinação empírica. A ampla reatividade cruzada prevista (humano, camundongo, rato e outros) torna este anticorpo uma ferramenta versátil, mas os padrões de coloração devem ser verificados com controles biológicos apropriados.
• O alto conservacionismo evolutivo da Histona H4 fundamenta a ampla reatividade de espécies prevista. No entanto, recomendamos validar o anticorpo em sua espécie e modelo de tecido específicos devido a possíveis variações na fixação ou processamento.

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