Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H4-K5 (P62805) – Aplicações em WB, ELISA, ChIP

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

• A histona H4 é um componente central do nucleossomo, envolvendo e compactando o DNA em cromatina. Isso limita a acessibilidade do DNA aos mecanismos celulares que requerem o DNA como molde, colocando as histonas no centro da regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: nenhuma citada diretamente; anotação funcional geral.

• A acessibilidade do DNA é modulada através de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) conhecidas como o "código de histonas", juntamente com a remodelação do nucleossomo. Uma PTM crítica é a acetilação da lisina 5 (K5), que corresponde à N6-acetillisina na posição 6 da sequência canônica do UniProt. Referências relacionadas: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

• A localização subcelular é predominantemente nuclear, com associação aos cromossomos. Durante a espermatogênese, observou-se que a Histona H4 acetilada se localiza especificamente no núcleo em espermátides do estágio 11. Referências relacionadas: (Por similaridade) UniProtKB P62805.

• A histona H4 sofre inúmeras outras modificações, incluindo metilação, citrulinização, crotonilação, fosforilação e ubiquitinação, que coletivamente orquestram padrões de expressão gênica e dinâmica da cromatina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético que abrange a região K5 da Histona H4 humana. Este design visa conferir alta especificidade para a forma acetilada da proteína.
• Para Western blot (WB), considere o uso de extratos enriquecidos com núcleos ou histonas extraídas por ácido para melhorar a detecção. Espera-se uma banda em torno de 11 kDa.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para capturar ou detectar peptídeos de histona acetilados ou proteínas Histona H4 recombinantes. A titulação é recomendada para uma relação sinal-ruído ideal.
• Para imunoprecipitação de cromatina (ChIP), este anticorpo pode ser considerado para enriquecer regiões genômicas marcadas por H4K5ac. A validação no tipo celular relevante e controles apropriados (por exemplo, IgG não imune, cromatina de entrada) é essencial.
• Devido à alta conservação do terminal N da histona H4, prevê-se uma ampla reatividade cruzada entre humanos, camundongos, ratos e potencialmente outras espécies. No entanto, recomenda-se a verificação experimental na espécie alvo.

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