Acetyl-Histone H4 (K8) Anticorpo Policlonal de Coelho (P62805) - WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP, ChIP-seq

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é um componente central do nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, restringindo assim a acessibilidade do DNA às máquinas celulares que requerem o DNA como molde. Através dessas interações, as histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica.

A acessibilidade do DNA é regida por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) nas histonas, coletivamente referidas como o "código de histonas", bem como pelo remodelamento de nucleossomos. A histona H4 é extensivamente modificada, particularmente em sua cauda N-terminal, com marcas incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e ubiquitinação.

A acetilação na lisina 8 (K8) da histona H4 — correspondente à posição 9 na sequência UniProt (P62805) — é uma modificação bem caracterizada associada à cromatina aberta e ativação transcricional. Esta modificação é regulada dinamicamente por histona acetiltransferases (HATs) e desacetilases (HDACs). Referências relacionadas: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

A histona H4 é localizada principalmente no núcleo e nos cromossomos. Em certos tipos de células, como espermátides, a H4 acetilada é observada concentrando-se no núcleo durante estágios específicos do desenvolvimento.

A histona H4 é codificada por múltiplas cópias de genes, incluindo HIST1H4A a HIST1H4L, HIST2H4A/B e HIST4H4, que produzem sequências proteicas idênticas. Esta alta conservação entre espécies sustenta sua ampla reatividade cruzada prevista.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para ChIP e ChIP-seq, considere otimizar as condições de reticulação e cisalhamento da cromatina para preservar a modificação acetil lábil. O uso de inibidores de histona desacetilase (por exemplo, butirato de sódio, TSA) durante a colheita das células pode aumentar a detecção.
• No Western blotting (WB), recomenda-se incluir tanto o peptídeo acetilado de histona H4 quanto o peptídeo não acetilado como controles de bloqueio para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Devido à alta conservação da histona H4, espera-se que este anticorpo apresente reatividade cruzada com uma ampla gama de espécies; no entanto, é aconselhável a validação no sistema de amostra relevante.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), os protocolos de fixação e permeabilização devem ser cuidadosamente avaliados, pois o epítopo acetilado pode ser sensível a tratamentos rigorosos.
• Ao utilizar este anticorpo, a consistência entre lotes deve ser monitorada, especialmente em ensaios quantitativos, conforme o padrão para reagentes policlonais.

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