Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H4 K91 (P62805) – WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é uma das histonas centrais que formam o nucleossomo, a unidade fundamental da cromatina. Junto com H2A, H2B e H3, ela envolve o DNA ao redor do octâmero de histonas, compactando o genoma e regulando o acesso para transcrição, replicação e reparo. A histona H4 desempenha um papel central na regulação dinâmica da estrutura da cromatina através de uma vasta gama de modificações pós-traducionais (PTMs), coletivamente conhecidas como "código de histonas". Essas modificações incluem acetilação, metilação, fosforilação, ubiquitinação e muitas outras, que ocorrem predominantemente na cauda N-terminal, mas também no domínio globular.

A acetilação de resíduos específicos de lisina na histona H4 está associada à ativação transcricional e à estrutura de cromatina aberta. A lisina 91 (K91), localizada dentro do domínio globular da H4, é um desses resíduos que pode ser acetilado. A acetilação em K91 (correspondente a K92 no isoforma P62805 da UniProt) demonstrou regular a dinâmica da cromatina e pode influenciar os processos de reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:19818714

A natureza altamente conservada da histona H4 entre os eucariotos garante que anticorpos específicos de acetilação, como este anti-acetil-H4-K91, apresentem ampla reatividade cruzada, tornando-os ferramentas valiosas para estudos epigenéticos em múltiplas espécies. A H4 está predominantemente localizada no núcleo, associada aos cromossomos, e está presente durante todo o ciclo celular, com padrões específicos de acetilação mudando durante a diferenciação e o desenvolvimento. Referências relacionadas: UniProt P62805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), use extratos nucleares enriquecidos em histonas ou histonas extraídas com ácido para melhorar a detecção. Considere incluir um controle negativo, como um peptídeo não acetilado ou um tratamento com inibidor de desacetilase (por exemplo, TSA), para confirmar a especificidade para a forma acetilada K91. O peso molecular previsto da histona H4 é de aproximadamente 11 kDa, mas a migração pode variar ligeiramente dependendo das PTMs.
• Em imunofluorescência / imunocitoquímica (IF/ICC), otimize as condições de fixação e permeabilização (por exemplo, fixação com PFA a 4% ou metanol, seguida de Triton X-100 a 0,1%) para preservar o epítopo. A coloração simultânea com corantes de DNA (por exemplo, DAPI) pode confirmar a localização nuclear.
• Para aplicações de ELISA, use peptídeo K91 acetilado sintético versus peptídeo não modificado como antígenos de revestimento para avaliar a especificidade e o título do anticorpo. Prevê-se que este anticorpo reaja cruzadamente com camundongo, rato e outras espécies devido à alta homologia de sequência da histona H4, mas verifique no seu sistema experimental.

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