Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Acetil-Histona H4 (Lis5) (P62805) para WB, ChIP, CUT&Tag

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é um componente central do nucleossomo, essencial para a compactação do DNA em cromatina e regulação da transcrição, replicação, reparo do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é governada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais conhecidas como "código das histonas".

A acetilação da histona H4 na lisina 5 (K5; correspondente à Lys-6 no UniProt P62805) é uma modificação pivotal associada a estados de cromatina ativa. Esta marca é depositada por histona acetiltransferases (HATs) e removida por desacetilases (HDACs), influenciando dinamicamente a expressão gênica. A H4K5 acetilada é enriquecida nas regiões promotoras de genes ativamente transcritos e contribui para a descompactação da cromatina e ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

A histona H4 é codificada por múltiplas cópias gênicas (H4C1–H4C16) localizadas em clusters de histonas nos cromossomos 1 e 6. A proteína é altamente conservada entre espécies, o que explica a ampla reatividade cruzada prevista para este anticorpo. A H4 está sujeita a extensas modificações combinatórias; a K5 também pode sofrer outras acilações, como crotonilação, butirilação e 2-hidroxiisobutilação, destacando a complexidade do código das histonas.

Subcelularmente, a histona H4 é principalmente nuclear e se associa aos cromossomos. Durante a espermatogênese, a H4 acetilada localiza-se no núcleo em espermátides do estágio 11. As modificações da cauda N-terminal, incluindo a acetilação da K5, desempenham papéis fundamentais no remodelamento da cromatina e no recrutamento de proteínas efetoras. Referências relacionadas: UniProt P62805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho foi produzido contra um peptídeo acetilado sintético abrangendo a lisina 5 da histona H4 humana. Espera-se que reconheça especificamente a H4 acetilada em K5 (Lys-6 no UniProt P62805) e possa ter reatividade cruzada mínima com H4 não modificada ou outras lisinas acetiladas.
• Para Western blot (WB), considere usar preparações de proteínas enriquecidas em histonas ou extraídas com ácido para melhorar o sinal. O peso molecular previsto da histona H4 é de 11 kDa.
• Em imunoprecipitação (IP) e aplicações baseadas em cromatina (ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag), faça titulação do anticorpo e otimize as condições de ligação cruzada/fixação. A ampla reatividade cruzada prevista entre espécies (humano, camundongo, rato e outros) sugere utilidade em diversos modelos mamíferos, mas a validação no sistema de amostra específico é recomendada.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e ELISA, garanta controles apropriados (por exemplo, competição com peptídeo não acetilado) para confirmar a especificidade do sinal.

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