Anticorpo Monoclonal de Coelho para Acetil-p53 (K370) (P04637) para Western Blot e ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de p53 (TP53)

p53 (Antígeno tumoral celular p53, TP53) é uma proteína supressora de tumor bem caracterizada que atua como um fator de transcrição multifuncional. Ela induz a parada do ciclo celular, reparo de DNA ou apoptose ao se ligar às sequências alvo do DNA, mantendo assim a estabilidade genômica e prevenindo o desenvolvimento de câncer (PubMed:11025664, 12524540, 12810724, 15340061, 17317671, 24051492).

Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:17317671, PMID:24051492

Estudos de localização subcelular mostram que p53 é predominantemente nuclear em condições normais, mas pode se translocar para o citoplasma, mitocôndrias, corpos PML e retículo endoplasmático em resposta a vários estresses celulares. Essa compartimentalização dinâmica é fundamental para suas diversas funções, incluindo a regulação da transcrição e a indução da apoptose (PubMed:15340061, 22726440, 11025664, 12810724, 17170702, 25168243, 27323408, 28842590).

Referências relacionadas: PMID:15340061, PMID:22726440, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:17170702, PMID:25168243, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 é expressa de forma ubíqua na maioria dos tecidos, com múltiplas isoformas que exibem padrões de expressão distintos. A isoforma principal 1 é amplamente expressa, enquanto outras isoformas apresentam presença ou ausência tecido-específica, adicionando uma camada de complexidade regulatória (PubMed:16131611).

Referências relacionadas: PMID:16131611

A atividade de p53 é rigidamente controlada por extensas modificações pós-traducionais (PTMs), incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação. A lisina 370 (K370) no domínio regulatório C-terminal é um ponto quente para essas modificações, sofrendo metilação e dimetilação por enzimas como SMYD2 e outras, que modulam a estabilidade e a atividade transcricional de p53. Este anticorpo foi gerado usando um peptídeo sintético acetilado ao redor de K370 do p53 humano (P04637), reconhecendo especificamente a forma acetilada nesse resíduo. A acetilação em K370 está associada ao aumento da ligação ao DNA e à ativação dos genes alvo de p53, ligando-a à supressão tumoral.

Referências relacionadas: PMID:17108971, PMID:22864287 (Para metilação/dimetilação em K370)

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi desenvolvido em coelho e é monoclonal, garantindo alta especificidade e consistência entre lotes.
• Para Western blotting, considere enriquecer os extratos de proteínas nucleares, já que p53 é predominantemente nuclear; no entanto, dependendo das condições de estresse celular, p53 também pode estar presente nas frações citoplasmáticas ou mitocondriais.
• Valide o desempenho do anticorpo em amostras de controle positivo conhecidas por expressar p53 acetilado, como células tratadas com inibidores de desacetilases (por exemplo, triostatina A ou nicotinamida) ou agentes danificadores do DNA (por exemplo, etoposida, doxorrubicina).
• Ao usar ELISA, revesta a placa com o peptídeo imunógeno (acetilado) e um peptídeo controle não acetilado para confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada é confirmada para humano e camundongo, mas considere o alinhamento de sequência se testar outras espécies.
• Otimize as diluições de trabalho empiricamente; as diluições iniciais recomendadas são: WB 1:500‑1:2000, ELISA 1:1000‑1:5000 (deve ser titulada pelo usuário final).

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento One-Stop

A CamelBio é sua parceira abrangente para o fornecimento de matérias-primas para IVD, oferecendo uma solução completa desde o conceito até a clínica. Fornecemos pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e materiais especializados para alvos raros para atender às suas necessidades de diagnóstico e pesquisa. Este anticorpo monoclonal de coelho anti acetil-p53 (K370) (P04637) é uma ferramenta de alta qualidade para pesquisa em apoptose e câncer, exemplificando nosso compromisso em fornecer reagentes essenciais para a compreensão dos mecanismos de supressão tumoral. Parcerie com a CamelBio para otimizar sua aquisição e acelerar seus projetos.