Produtos Antibodies Acetylated Antibodies Acetyl-p53-K382 Anticorpo Policlonal de Coelho (P04637) para Dot Blot e ELISA
Acetyl-p53-K382 Anticorpo Policlonal de Coelho (P04637) para Dot Blot e ELISA

Acetylated Antibodies

Acetyl-p53-K382 Anticorpo Policlonal de Coelho (P04637) para Dot Blot e ELISA

Número do item : CM0000103

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Aplicação
DB, ELISA
Reatividade Cruzada
Humano
Peso Proteico
44kDa
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Parâmetro Valor
Nome do Produto Acetyl-p53-K382 Rabbit pAb
Observações/Apelido P53; BCC7; LFS1; BMFS5; TRP53; Acetyl-p53-K382
Espécie Humano
GeneID (humano) 7157
GeneID 7157
Imunógeno Um peptídeo acetilado sintético em torno da K382 do p53 humano (NP_000537.3)
Fonte Coelho
Categoria Anticorpos Acetilados
Aplicação DB, ELISA
Reatividade Cruzada Humano
SWISS P04637
Peso da Proteína 44kDa
Envio Saco com gelo

Contexto Biológico: Função e Localização do Antígeno Tumoral Celular p53 (TP53)

O antígeno tumoral celular p53 (TP53) é um fator de transcrição multifuncional que desempenha um papel central na supressão tumoral, induzindo parada do ciclo celular, reparo de DNA ou apoptose em resposta ao estresse celular. Atua como guardião do genoma, regulando negativamente a divisão celular ao controlar a expressão de genes-alvo chave, incluindo inibidores de quinases dependentes de ciclina. A apoptose mediada por p53 envolve a estimulação da expressão dos antígenos BAX e FAS ou a repressão de Bcl-2, e sua atividade pró-apoptótica é modulada por interações com proteínas da família ASPP. Além disso, o p53 regula o relógio circadiano reprimindo a transcrição mediada por CLOCK-BMAL1 de PER2. Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:24051492

O p53 localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares dependendo do seu estado de ativação e isoforma. É predominantemente nuclear, mas pode ser encontrado no citoplasma, nos corpos nucleares de PML, mitocôndrias, retículo endoplasmático e no centrossoma. A translocação para as mitocôndrias ocorre sob estresse oxidativo ou tratamento com mitomicina C, onde o p53 coopera com a PPIF para ativar a necrose. Referências relacionadas: PMID:15340061, PMID:17170702, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:22726440, PMID:27323408, PMID:28842590

O p53 é expresso de forma ubíqua, mas as suas isoformas apresentam variação dependente do tecido. A isoforma 2 está ausente no cérebro, pulmão e próstata, enquanto a isoforma 8 é limitada ao cólon, medula óssea, testículo, cérebro fetal e intestino. Referências relacionadas: PMID:16131611

O p53 sofre extensas modificações pós-traducionais que regulam a sua estabilidade e atividade. A acetilação na lisina 382 (K382) é mediada por acetiltransferases como p300/CBP e aumenta a ligação do p53 ao DNA e a ativação transcricional. Esta modificação pode ser revertida por desacetilases, e a K382 também pode ser metilada ou dimetilada, destacando uma rede regulatória complexa. Referências relacionadas: PMID:10656795, PMID:15448695, PMID:20228809, PMID:23431171, PMID:29681526, PMID:19608861, PMID:17707234, PMID:20870725, PMID:22864287

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

  • O imunógeno é um peptídeo acetilado sintético correspondente aos resíduos em torno da K382 do p53 humano. Espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma acetilada; a reatividade cruzada com o peptídeo não modificado ou outras modificações neste local deve ser testada.
  • Para aplicações de dot blot, considere o uso de amostras de proteínas desnaturadas ou peptídeos manchados em membranas. Para ELISA, o revestimento com o peptídeo imunógeno ou a proteína p53 de comprimento total pode ser adequado.
  • Como os anticorpos policlonais podem apresentar variação de lote para lote, valide a especificidade do anticorpo no seu sistema experimental usando controles apropriados (por exemplo, competição com peptídeo não acetilado, ou lisados de células tratadas com inibidores de desacetilases como tricostatina A).
  • A indução da acetilação do p53 pode ser alcançada tratando as células com agentes danificadores do DNA (por exemplo, doxorrubicina, etoposídeo) antes da preparação da amostra.
  • O anticorpo é enviado em sacos com gelo. Ao recebê-lo, alíquote e armazene a –20°C ou inferior para estabilidade a longo prazo. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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