Anticorpo Monoclonal de Alfa-Fetoproteína (AFP) de Camundongo para WB, IF/ICC, ELISA - P02771

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alfa-fetoproteína

• A Alfa-fetoproteína (AFP), também conhecida como alfa-1-fetoproteína e alfa-fetoglobulina, é uma glicoproteína secretada que pertence à família das albuminas.
• A AFP se liga a cobre, níquel e ácidos graxos, e também apresenta capacidade moderada de ligação à bilirrubina, embora de forma menos eficiente que a albumina sérica.
• Apenas uma fração menor (menos de 2%) da AFP humana demonstra propriedades de ligação ao estrogênio, indicando interação limitada com ligandos hormonais.
• É predominantemente sintetizada pelo fígado fetal e saco vitelino, sendo mais abundante no plasma fetal; seus níveis diminuem abruptamente após o nascimento e permanecem baixos em adultos saudáveis.
• A proteína é rica em modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, fosforilação e sulfatação, além de conter múltiplas pontes dissulfeto.
• Estruturalmente, apresenta domínios repetitivos e é classificada como uma fosfoproteína secretada de ligação a metais.
• Como um biomarcador clínico bem estabelecido, níveis elevados de AFP sérica estão associados a carcinoma hepatocelular, tumores de células germinativas e distúrbios do desenvolvimento fetal, tornando-o um alvo crítico para o desenvolvimento de anticorpos diagnósticos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre quase todo o comprimento da proteína madura (aminoácidos 19–609), o que pode proporcionar epítopos em múltiplos domínios; considere o mapeamento de epítopos se a detecção específica de domínios for necessária.
• Para Western blot, o peso da proteína reportado é de 69 kDa; no entanto, devido à glicosilação, a banda observada pode sofrer deslocamento, e condições redutoras/não redutoras podem ser testadas para obtenção de resolução ideal.
• Em imunofluorescência/ICC, a AFP é secretada e pode apresentar um padrão de coloração vesicular ou extracelular; a fixação e permeabilização adequadas (se necessárias) devem ser validadas para o tipo de célula alvo.
• Para aplicações em ELISA, o teste de pareamento com anticorpos de detecção que reconhecem epítopos não sobrepostos é recomendado para evitar competição; o imunógeno recombinante pode servir como controle positivo.
• A reatividade cruzada com AFP de camundongo é reportada; ao usar modelos murinos, a AFP endógena pode ser detectada; inclua controles adequados para distinguir sinais exógenos de endógenos.
• Amostras de soro/plasma são típicas para detecção de AFP; considere a otimização da diluição da amostra devido à alta concentração de AFP em certas condições.

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