Anticorpo Policlonado de Coelho para Alpha2-adaptina/AP2A2 para WB, IF/ICC, ELISA - O94973

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alpha2-adaptina/AP2A2

• A Alpha2-adaptina/AP2A2 é a subunidade alfa-2 do complexo proteico adaptador 2 (AP-2), codificada pelo gene AP2A2 em humanos (também conhecido como ADTAB, CLAPA2, HIP9, HYPJ). Múltiplas isoformas são produzidas por splicing alternativo.
• O AP-2 atua na endocitose mediada por clatrina, facilitando a seleção de carga e a formação de vesículas na membrana plasmática. Ele reconhece motivos específicos de sinalização para endocitose (Y-X-X-Phi e [ED]-X-X-X-L-[LI]) em moléculas de carga transmembrana.
• O AP-2 está envolvido na reciclagem de membranas de vesículas sinápticas e no tráfego pós-endocítico. Durante a potencialização de longo prazo em neurônios hipocampal, o AP-2 medeia a endocitose de ADAM10. Referências relacionadas: PMID:23676497
• A subunidade alfa se liga a lipídios contendo polifosfoinositídeo, posicionando o AP-2 na membrana, e seu domínio de apêndice C-terminal atua como uma plataforma de estrutura para proteínas acessórias endocíticas.
• O AP-2 se localiza predominantemente na membrana celular e nas fossas revestidas por clatrina, o que é consistente com seu papel na endocitose.
• AP2A2 é expressa no cérebro (em nível proteico), sugerindo um papel fundamental nos processos endocíticos neuronais.
• Palavras-chave do UniProt: Splicing alternativo, Membrana celular, Fossa revestida, Endocitose, Ligação a lipídios, Membrana, Transporte de proteínas, Proteoma de referência, Transporte.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 590-939 da Alpha2-adaptina/AP2A2 humana (região C-terminal), o que pode favorecer a detecção da proteína de comprimento total ou de isoformas específicas. Valide o anticorpo com o sistema de amostras do seu alvo.
• Para western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 104 kDa. Use marcadores de peso molecular adequados e otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para o seu tipo de lisado (humano, camundongo ou rato, de acordo com os dados de reatividade cruzada).
• Na imunofluorescência (IF/ICC), a permeabilização é necessária para acessar a Alpha2-adaptina/AP2A2 intracelular. A co-coloração com marcadores endocíticos ou de membrana pode ajudar a confirmar a localização nas fossas revestidas.
• Para aplicações de ELISA, considere usar este anticorpo policlonado como reagente de captura ou detecção após determinar as condições ótimas de revestimento e detecção com controles de proteína recombinante ou peptídeo.
• Como um anticorpo policlonado de coelho, ele pode reconhecer múltiplos epítopos, aumentando potencialmente a sensibilidade, mas exigindo validação cuidadosa da especificidade no seu ensaio.

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