Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-14-3-3 sigma para WB, IHC-P, ELISA - P31947

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da 14-3-3 sigma

• A 14-3-3 sigma (também conhecida como Estratifina ou proteína marcadora de células epiteliais 1) é uma proteína adaptadora codificada pelo gene SFN, expressa predominantemente em tecidos enriquecidos com epitélio queratinizado estratificado.
• Ela atua ligando a motivos de fosfoserina/fosfotreonina em uma ampla gama de parceiros de sinalização, modulando geralmente sua atividade, e está implicada em vias como o ciclo celular, a apoptose e a sinalização de crescimento (PubMed:15731107, PubMed:22634725, PubMed:28202711). Referências relacionadas: PMID:15731107, PMID:22634725, PMID:28202711
• Ela atua como um inibidor regulado por TP53/p53 da progressão do ciclo celular G2/M, contribuindo para o checkpoint de danos no DNA (PubMed:9659898). Referências relacionadas: PMID:9659898
• A 14-3-3 sigma promove a retenção citosólica da GTPase GBP1 ao se ligar a GBP1 fosforilada, inibindo assim a resposta imune inata (PubMed:37797010). Referências relacionadas: PMID:37797010
• Em células epiteliais, mantém a adesão das junções celulares dos desmossomos ao interagir e sequestrar PKP3 no citoplasma, o que facilita a troca nas placas dos desmossomos e preserva a adesão intercelular (PubMed:24124604, PubMed:29678907). Referências relacionadas: PMID:24124604, PMID:29678907
• A proteína pode regular a autoubiquitação e degradação de MDM2, ativando assim p53/TP53 (PubMed:18382127). Referências relacionadas: PMID:18382127
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo e a secreção, consistente com seus diversos papéis na transdução de sinal e na comunicação intercelular.
• As principais modificações pós-traducionais incluem fosforilação e conjugação de ubiquitina, que ajustam finamente suas funções e interações.
• A expressão tecidual é amplamente restrita aos epitélios escamosos estratificados, o que torna essa proteína um marcador útil para estudos de diferenciação epitelial e patologia.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para a região N-terminal (aminoácidos 1-100) da 14-3-3 sigma humana. Esta região pode conter fosfoepítopos críticos; certifique-se de que a preparação da sua amostra preserve os estados de fosforilação, se for relevante.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em torno de 28 kDa (o peso molecular calculado é de ~27,8 kDa). Valide com controles positivos apropriados, como lisados de tecido epitelial estratificado ou linhas celulares (por exemplo, HaCaT, A431) onde a expressão endógena é esperada.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), considere métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) e verifique a especificidade usando pele, esôfago ou outro epitélio escamoso como tecidos de controle positivo.
• Em ELISA, o imunógeno baseado em peptídeo permite a cobertura direta do peptídeo para configurações padrão de ensaio; titule a concentração do anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído.
• A reatividade cruzada com a 14-3-3 sigma de camundongo é relatada; no entanto, recomenda-se o alinhamento de sequência entre espécies antes da aplicação a outros organismos modelo.

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