Anticorpo Policlonal Anti-14-3-3 Theta para WB, ELISA - P27348

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da 14-3-3 Theta

• A proteína theta 14-3-3, também designada proteína 14-3-3 de células T, proteína 14-3-3 tau ou Proteína HS1, é codificada pelo gene YWHAQ.
• Funciona como uma proteína adaptadora em diversas vias de sinalização, ligando-se tipicamente a motivos contendo fosfoserina ou fosfotreonina em proteínas parceiras, modulando assim a sua atividade.
• Especificamente, a 14-3-3 theta regula negativamente a atividade cinase da PDPK1, impactando as redes de sinalização a jusante.
• A proteína localiza-se principalmente no citoplasma, consistente com o seu papel na transdução de sinal intracelular.
• A expressão é abundante no cérebro, coração e pâncreas, com níveis mais baixos no rim e placenta. Notavelmente, é regulada positivamente na medula espinhal lombar de pacientes com ELA esporádica, particularmente naqueles com envolvimento predominante do neurônio motor inferior.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, nitração, fosforilação e conjugação tipo ubiquitina, bem como a formação de ligações isopeptídicas, que provavelmente regulam as suas interações e estabilidade.
• Está disponível uma estrutura tridimensional, fornecendo informações sobre a sua ranhura de ligação a fosfopeptídeos e arquitetura dimérica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 49–149 da 14-3-3 theta humana) visa uma região específica, possivelmente adequada para a deteção de epítopos lineares em condições de Western blot (WB) desnaturantes.
• Para ELISA, considere usar o peptídeo imunógeno como controlo positivo ou antigénio de revestimento para validar a especificidade do ensaio.
• Com reatividade cruzada relatada para camundongo e rato, este anticorpo pode ser utilizado em estudos comparativos; confirme a reatividade no tecido ou linhagem celular relevante antes da análise quantitativa.
• O peso molecular previsto é de ~28 kDa; verifique o tamanho da banda usando marcadores de peso molecular apropriados e considere que as modificações pós-traducionais podem causar ligeiras variações.
• Como a 14-3-3 theta é citoplasmática, a fracionamento subcelular ou a imunoprecipitação podem enriquecer o alvo e melhorar a sensibilidade de deteção em amostras complexas.
• Anticorpos policlonais podem apresentar variações entre lotes; inclua uma otimização adequada de bloqueio e lavagem para minimizar a ligação inespecífica.

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