Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-A2ML1 para WB, ELISA - A8K2U0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Semelhante à Alfa-2-Macroglobulina 1

• A2ML1 (Proteína Semelhante à Alfa-2-Macroglobulina 1) é um inibidor de protease secretado pertencente à família da alfa-2-macroglobulina. Também é conhecida como OMS, p170 ou CPAMD9.
• Inibe todas as quatro classes de proteinases através de um mecanismo de captura único. Uma região isca com sítios de clivagem específicos, quando clivada, induz uma mudança conformacional que aprisiona a protease. A enzima aprisionada permanece ativa contra substratos pequenos, mas não contra os grandes.
• Após a clivagem, uma ligação tioéster é hidrolisada, mediando a ligação covalente do A2ML1 à protease. Este mecanismo envolve ligações dissulfeto chave e contribui para a sua especificidade inibitória.
• O A2ML1 exibe atividade inibitória contra quimotripsina, papaína, termolisina e subtilisina A, e, em menor extensão, elastase, mas não contra tripsina.
• A proteína pode desempenhar um papel importante na descamação epidérmica, inibindo proteases extracelulares. É expressa predominantemente na camada granular na borda apical dos queratinócitos, com expressão adicional na placenta, testículo e timo.
• Codificada pelo gene A2ML1 no cromossoma 12 (lócus 12p13.31), a proteína sofre splicing alternativo e é detectada como uma glicoproteína de 161 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise por Western blot, considere usar SDS-PAGE redutor para detetar uma banda em aproximadamente 161 kDa. Valide o anticorpo no seu sistema de lisado celular ou de tecido relevante.
• O imunogénio (aminoácidos 400-500) provavelmente é conservado entre humano e rato, suportando a reatividade cruzada relatada. Execute um alinhamento de sequências para verificar a conservação do epítopo se usar este anticorpo noutras espécies.
• Para aplicações de ELISA, faça uma titulação do anticorpo para determinar as concentrações ótimas de revestimento e deteção contra A2ML1 nativo ou recombinante. Inclua controlos apropriados para minimizar o fundo.
• Dado o papel da proteína na inibição de proteases, tenha cautela com possíveis interações com proteases endógenas nas preparações de amostra que possam afetar a deteção.

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