Anticorpo Policlonal Anti-AADAC para WB, ELISA - P22760

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do AADAC

• AADAC (desacetilase de arilacetamida, também denominada DAC ou CES5A1) é uma hidrolase de serina pertencente à família das esterases de carboidratos.
• Apresenta atividade celular de lipase de triglicerídeos no fígado, hidrolisando os estoques de triglicerídeos recém-formados para aumentar os níveis intracelulares de ácidos graxos e contribuindo para a montagem de lipoproteínas de muito baixa densidade (VLDL).
• AADAC apresenta atividade de esterases de serina e desacetila uma variedade de substratos de arilacetamida, incluindo compostos xenobióticos e pró-carcinógenos, convertendo-os em compostos de arilamida primária com toxicidade aumentada.
• A proteína está ancorada às membranas do retículo endoplasmático e dos microssomos por meio de um único domínio transmembrana.
• No nível proteico, AADAC é detectado no fígado e é predominantemente expresso nos tecidos do fígado, intestino delgado, cólon, glândula adrenal e bexiga.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e a presença de uma ligação dissulfeto, importantes para o dobramento adequado e a estabilidade.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aminoácidos 170-399); os anticorpos policlonais resultantes podem reconhecer tanto as formas completas quanto as formas truncadas de AADAC. Valide a especificidade utilizando controles positivos e negativos apropriados no sistema de amostra de interesse.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 46 kDa em lisados de fígado humano e de camundongo. Utilize amostras preparadas recentemente com inibidores de protease para minimizar a degradação.
• No ELISA, realize uma série de titulações para determinar a diluição ideal do anticorpo. A reatividade cruzada com AADAC de camundongo permite estudos comparativos entre espécies.
• Considerando a associação de AADAC às membranas, o enriquecimento das frações microssomais ou o uso de preparações de membrana hepática pode melhorar a sensibilidade da detecção.

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