Anticorpo policlonal de coelho anti-AARS/AARS1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P49588

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da alanina--tRNA ligase citoplasmática

• A alanina--tRNA ligase citoplasmática (AARS1/AARS), também conhecida como alanil-tRNA sintetase (AlaRS), é uma enzima multifuncional codificada pelo gene AARS1.
• Sua função canônica é catalisar a ligação da alanina ao seu tRNA(Ala) cognato dependente de ATP, uma etapa essencial para a tradução de proteínas. Ela também possui um domínio de edição para hidrolisar o tRNA(Ala) carregado incorretamente. Referências relacionadas: PMID:27622773, PMID:27911835, PMID:28493438
• Em condições de alta concentração de lactato, a AARS1 atua adicionalmente como uma lactiltransferase de proteínas, transferindo grupos lactila para resíduos de lisina das proteínas-alvo. Essa atividade não canônica regula fatores de transcrição como TP53/p53, TEAD1 e YAP1. Referências relacionadas: PMID:38512451, PMID:38653238, PMID:39322678
• A proteína está localizada tanto no citoplasma quanto no núcleo, em concordância com seus papéis na tradução e na regulação transcricional.
• As modificações pós-traducionais da AARS1 incluem acetilação, fosforilação, metilação e ubiquitinação, que podem modular suas atividades enzimáticas e interações.
• Mutações na AARS1 estão associadas a um espectro de distúrbios neurológicos, incluindo a doença de Charcot-Marie-Tooth tipo 2N (CMT2N), a encefalopatia epiléptica e do desenvolvimento 29 (DEE29) e a leucodistrofia hipomielinizante (HDLS2), destacando sua importância na homeostase neuronal.
• Ela requer zinco e ATP como cofatores para suas funções de aminoacilação e edição.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1–100 na região N-terminal da AARS humana. Essa região pode estar sujeita a modificações pós-traducionais; verifique a detecção de formas modificadas em seu sistema experimental.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado é de aproximadamente 107 kDa. A AARS1 endógena é expressa ubiquamente; certifique-se de carregar uma quantidade suficiente de amostra para tecidos com menor expressão.
• Na imunocitoquímica/imunofluorescência (ICC/IF), a fixação com paraformaldeído é geralmente compatível. Como a AARS1 transita entre o núcleo e o citoplasma, a localização celular pode variar dependendo do estado metabólico, por exemplo, dos níveis de lactato.
• Para imuno-histoquímica (IHC), as condições de recuperação antigênica devem ser otimizadas devido ao epítopo N-terminal. Considere utilizar um tampão à base de citrato em pH 6,0.
• Ao utilizar em ELISA, associe-o a um anticorpo de captura ou detecção validado para garantir a especificidade.

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