Anticorpo monoclonal de coelho anti-ABCA1 para WB, ELISA - O95477

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do ABCA1

• ABCA1 (membro 1 da subfamília A da cassete de ligação ao ATP), também conhecido como ABC-1 ou proteína reguladora do efluxo de colesterol, é uma ATPase transportadora de fosfolipídios.
• Ele catalisa a translocação dependente de ATP de fosfolipídios, preferencialmente fosfatidilcolina, do folheto citoplasmático para o folheto extracelular/luminal da membrana. Referências relacionadas: PMID:24097981 PMID:35974019
• Essa atividade de translocase medeia a transferência de fosfolipídios e colesterol para as apolipoproteínas, promovendo a formação de lipoproteínas de alta densidade (HDL) nascentes. Referências relacionadas: PMID:14754908 PMID:10533863 PMID:24097981
• Do ponto de vista mecanístico, o ABCA1 força os fosfolipídios através de uma abertura e de um anel na membrana, introduzindo-os em um túnel hidrofóbico alongado em seu domínio extracelular. Referências relacionadas: PMID:35974019
• A proteína está localizada na membrana celular e nos endossomos.
• O ABCA1 é amplamente expresso, com maior abundância em macrófagos, em concordância com seu papel na homeostase do colesterol.
• Ele sofre modificações pós-traducionais, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicosilação, fosforilação e palmitoilação.
• Devido à sua função crítica no transporte reverso do colesterol, o ABCA1 está implicado na aterosclerose e em distúrbios de deficiência de HDL.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• A sequência do imunógeno (aminoácidos 1170–1350) está localizada na região C-terminal do ABCA1 humano. Essa região apresenta alta homologia com os ortólogos de camundongo e rato, sustentando a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 254 kDa. Utilize géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e condições de transferência otimizadas para proteínas de alto peso molecular.
• Considere utilizar lisados de células de macrófagos (por exemplo, THP-1, RAW 264.7) como controles positivos para validar a detecção de ABCA1 endógeno.
• Para aplicações em ELISA, teste os formatos direto e sanduíche para determinar a sensibilidade ideal com este anticorpo monoclonal.
• Inclua sempre controles apropriados e valide o desempenho no seu sistema experimental específico.

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