Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ABCA1 para WB, ELISA - O95477

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ABCA1

• O ABCA1 (subfamília A de cassete de ligação de ATP, membro 1), também conhecido como ABC-1, CERP e proteína reguladora de efluxo de colesterol, é um membro da superfamília de transportadores de cassete de ligação de ATP (ABC).
• Funciona como uma ATPase transportadora de fosfolipídios, translocando fosfatidilcolina e fosfatidilserina do folheto citoplasmático para o extracelular das membranas, acoplado à hidrólise de ATP. Esta atividade é essencial para a transferência de fosfolipídios para apolipoproteínas, iniciando a formação de lipoproteínas de alta densidade nascentes (HDLs). Referências relacionadas: PMID:24097981, PMID:35974019
• O ABCA1 também medeia o efluxo de colesterol intracelular para apolipoproteínas, uma etapa crítica no transporte reverso de colesterol e maturação do HDL. Referências relacionadas: PMID:10533863, PMID:14754908, PMID:24097981
• Localizado principalmente na membrana celular e em endossomos, o ABCA1 é amplamente expresso, mas mais abundante em macrófagos, refletindo seu papel fundamental na homeostase do colesterol em macrófagos.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (fosfoproteína) e palmitoilación (lipidação), e a proteína contém ligações dissulfeto e sítios de glicosilação, que podem regular sua estabilidade e atividade.
• Dada a sua função no metabolismo lipídico, o ABCA1 está implicado na aterosclerose e doenças cardiovasculares relacionadas; mutações no ABCA1 estão associadas à doença de Tangier e deficiência familiar de HDL.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1170-1350 dentro da região C-terminal do ABCA1 humano. Esta região é prevista como intracelular, e anticorpos gerados contra ela podem detectar o ABCA1 de comprimento total em Western blots desnaturantes. Considere validar a especificidade em linhagens celulares com expressão conhecida de ABCA1, como macrófagos ou hepatócitos.
• Para Western blotting, note o alto peso molecular previsto do ABCA1 (~254 kDa). Use géis de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, gel 6%) e tempos de transferência estendidos para garantir a transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular. Inclua marcadores de peso molecular apropriados.
• Este anticorpo é relatado como reativo cruzado com ABCA1 de camundongo e rato. Ao usar nestas espécies, verifique a reatividade testando um controle positivo, como células ou tecidos derivados de macrófagos conhecidos por expressar ABCA1.
• Para aplicações de ELISA, otimize a concentração do anticorpo como reagente de captura ou detecção. A reatividade do anticorpo em ELISA pode permitir a medição quantitativa de ABCA1 em amostras biológicas; no entanto, o emparelhamento com um anticorpo de detecção adequado pode ser necessário para formatos sanduíche.

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