Anti-ABCA2 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9BZC7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ABCA2

• ABCA2 (subfamília A de cassete de ligação a ATP, membro 2), também conhecido como transportador de cassete de ligação a ATP 2 ou ABC2, é um membro da superfamília de transportadores ABC envolvido na translocação dependente de ATP de substratos através de membranas.
• Funciona como um provável transportador de lipídios que modula o sequestro de colesterol no endossomo tardio/lisossoma, regulando o metabolismo intracelular de esfingolipídios e participando da homeostase do colesterol. Referências relacionadas: PMID:15238223, PMID:21810484, PMID:24201375
• O ABCA2 pode alterar a distribuição transbilhar de ceramida em bicamadas de membranas intraluminais, favorecendo sua retenção no folheto externo e levando ao aumento da atividade da ceramidase ácida, o que facilita a desacilação da ceramida em esfingosina e o sequestro de colesterol livre lisossomal. Referências relacionadas: PMID:24201375
• A proteína também está envolvida na regulação da produção de beta-amiloide (Aβ), seja modulando o metabolismo de esfingolipídios para afetar a transcrição da proteína precursora de amiloide (APP) ou através de seu papel no processamento da APP pela gama-secretase. Referências relacionadas: PMID:22086926, PMID:26510981
• O ABCA2 pode desempenhar um papel na formação de mielina (por similaridade).
• Em nível subcelular, o ABCA2 localiza-se principalmente nas membranas de endossomos e lisossomos.
• A análise de expressão tecidual mostra níveis elevados no cérebro, leucócitos de sangue periférico e ovário, com menor expressão no rim e no fígado.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação e metilação; a proteína apresenta dois domínios de ligação a ATP e múltiplas hélices transmembrana, consistentes com sua função de transportador.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 140–350) encontra-se na região N-terminal do ABCA2 humano; os usuários devem verificar a identidade da sequência com a espécie alvo se a reatividade cruzada for esperada além de humano, camundongo e rato.
• Para Western blot, devido ao grande tamanho da proteína (~270 kDa), use um gel de poliacrilamida de alta porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência estendidos para um blotting eficiente.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados para detectar proteínas de membrana endossomal/lisossomal; considere o uso de metanol ou permeabilização baseada em detergente.
• O desempenho em ELISA pode ser avaliado usando fragmentos recombinantes de ABCA2 ou lisados celulares; ELISA indireto pode ser adequado para determinação de título.
• Ao analisar tecidos de camundongo ou rato, confirme a reatividade cruzada através do alinhamento de sequência da região do imunógeno e considere o uso de controles positivos apropriados.

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