Anticorpo Policlonais Anti-ACC1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q13085

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ACC1

• Codificado pelo gene ACACA, a acetil-CoA carboxilase 1 (ACC1) é uma enzima multifuncional de 266 kDa que pertence à família das carboxilases dependentes de biotina e contém os domínios biotina carboxilase, carreador de biotina carboxila e carboxiltransferase.
• ACC1 catalisa a carboxilação dependente de ATP da acetil-CoA em malonil-CoA, a primeira etapa e etapa limitante da taxa na biossíntese de novo de ácidos graxos, que ocorre por meio de um mecanismo biotecnológico de duas etapas (PubMed:20457939, PubMed:20952656, PubMed:29899443). Referências relacionadas: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• A enzima funciona como um homodímero e sua atividade é regulada alostericamente por citrato e palmitoil-CoA, desempenhando um papel central no metabolismo lipídico.
• Subcelularmente, ACC1 é localizada no citoplasma e no citosol, onde fornece malonil-CoA para a síntese de ácidos graxos e o alongamento da cadeia.
• ACC1 é amplamente expressa, notavelmente no cérebro, placenta, músculo esquelético, tecidos renal, pancreático e adiposo, mas está ausente do fígado em condições normais.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, modulam a atividade da enzima ACC1 em resposta a sinais hormonais e nutricionais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2266–2346 próximos ao C-terminal de ACC1 humano; anticorpos direcionados a essa região podem reconhecer a proteína de comprimento completo e potencialmente algumas isoformas.
• Para Western blot, devido ao alto peso molecular de ACC1 (~266 kDa), considere usar um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (ex.: gel 6%) e estender o tempo de transferência com metanol reduzido para garantir uma transferência eficiente para a membrana.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), teste condições de recuperação de antígeno (ex.: tampão de citrato pH 6,0 ou EDTA pH 8,0), pois a fixação pode mascarar os epítopos de proteínas grandes; inclua tecidos de controle positivo como placenta ou músculo esquelético.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), otimize a fixação (ex.: 4% de PFA) e a permeabilização (ex.: Triton X-100) para equilibrar acessibilidade ao antígeno e morfologia.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada no sistema de ensaio pretendido; considere usar um lisado de controle positivo validado (ex.: de células HEK-293T ou HuH-7) para confirmar a reatividade.

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