Anticorpo monoclonal anti-acetil-CoA carboxilase para WB, IP, ELISA - Q13085 / O00763

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da acetil-CoA carboxilase 1

• A acetil-CoA carboxilase 1 (ACC1) é uma enzima citosólica dependente de biotina que catalisa a carboxilação da acetil-CoA, dependente de ATP, em malonil-CoA, a primeira etapa e limitante da velocidade da biossíntese de novo de ácidos graxos. Referências relacionadas: PMID:20457939, PMID:20952656, PMID:29899443
• A reação ocorre em duas etapas: carboxilação, dependente de ATP, do grupo prostético de biotina no domínio carboxiltransportador de biotina (BCC), seguida pela transferência do grupo carboxila para a acetil-CoA.
• A ACC1 é uma enzima multifuncional com os domínios carboxilase de biotina (BC), proteína carboxiltransportadora de biotina (BCCP) e carboxiltransferase (CT), permitindo sua complexa atividade catalítica.
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática e citosólica, consistente com seu papel na síntese citosólica de ácidos graxos.
• Expressão tecidual: a ACC1 é expressa no cérebro, placenta, músculo esquelético e tecidos renal, pancreático e adiposo; a expressão é baixa no tecido pulmonar e não é detectada no fígado.
• A enzima é rigorosamente regulada por fosforilação (por exemplo, pela AMPK), efetores alostéricos (ativação por citrato, inibição por palmitoil-CoA) e uso de promotores alternativos, destacando seu papel central no controle metabólico.
• A ACC2 (codificada por ACACB) é uma isoforma mitocondrial que gera malonil-CoA para inibir a carnitina palmitoiltransferase I, regulando a oxidação de ácidos graxos; o anticorpo pode reconhecer tanto a ACC1 quanto a ACC2 devido à homologia de sequência.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 500–600 da ACC1 humana (NP_942133.1), uma região provavelmente compartilhada com a ACC2; considere validar a especificidade da isoforma no sistema de amostra relevante.
• Para WB, devido ao alto peso molecular da ACC1 (265 kDa) e da ACC2 (276 kDa), use géis de SDS-PAGE com baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência prolongados; inclua marcadores pré-corados de alto peso molecular.
• Verifique o desempenho do anticorpo em sua espécie e aplicação; embora validada em humanos, camundongos e ratos, a reatividade cruzada em outras espécies ou formatos de ensaio deve ser confirmada empiricamente.
• Para IP, otimize a concentração do anticorpo e use sistemas de esferas apropriados (por exemplo, proteína A/G); considere o impacto da biotinilação ou da biotina endógena na detecção.
• Em ELISA, combine este anticorpo com um reagente de detecção de ACC adequado; teste a especificidade com controles de proteína ACC1 ou ACC2 recombinante.

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