Anticorpo Policlonal Anti-ACLY para WB, IHC-P, IF, ELISA - P53396

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ACLY

• ACLY codifica a ATP-citrato sintase, também conhecida como ATP-citrato (pro-S-)-liase (ACL) ou enzima de clivagem do citrato. É uma enzima lipogênica chave que catalisa a clivagem do citrato em oxaloacetato e acetil-CoA, fornecendo um substrato crítico para a biossíntese de lipídios de novo.
• A enzima atua como uma ponte entre o metabolismo de carboidratos e a síntese de ácidos graxos, gerando acetil-CoA citosólico, essencial para a produção de colesterol e ácidos graxos.
• ACLY está predominantemente localizada no citoplasma e citosol, onde acessa o citrato exportado das mitocôndrias.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, regulam a atividade da ACLY em resposta a sinais nutricionais e hormonais.
• O splicing alternativo produz múltiplas variantes de transcrito, potencialmente ajustando finamente a função enzimática em diferentes tecidos.
• ACLY pertence à família das acil-CoA sintetases (formadoras de AMP)/AMP-ácido ligases e requer ATP e magnésio como cofatores para sua atividade de transferase.
• Devido ao seu papel central na biossíntese de lipídios, a ACLY é um alvo de interesse em distúrbios metabólicos, pesquisa cardiovascular e estudos de metabolismo do câncer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aminoácidos 752–1101) da ACLY humana, o que pode aumentar a especificidade para a proteína-alvo.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~121 kDa; considere usar um gel de SDS-PAGE de 6–8% e condições de transferência apropriadas (por exemplo, transferência úmida a 100V por 60–90 minutos) para resolver esta proteína de alto peso molecular.
• Em IHC-P, métodos padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6.0) podem ser benéficos; experimentos piloto são recomendados para otimizar a relação sinal-ruído.
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser determinadas empiricamente; fixação com metanol ou tratamento com Triton X-100 a 0,1% são pontos de partida comuns para alvos citosólicos.
• Para verificar a especificidade do anticorpo, considere usar modelos celulares de knockdown ou knockout de ACLY, ou comparar com controles de tecido positivos/negativos conhecidos.

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