Anticorpo Policlonal Anti-ACP5 para WB, IF, IHC, ELISA - P13686

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ACP5

• O ACP5 codifica a fosfatase ácida resistente ao tartarato tipo 5 (TRAP, também conhecida como TrATPase), um membro da família das fosfatases ácidas responsável por reações de desfosforilação.
• A enzima desempenha um papel fundamental no metabolismo ósseo ao desfosforilar a osteopontina e a sialoproteína óssea, cruciais para a função dos osteoclastos e a reabsorção óssea.
• O ACP5 é uma enzima lisossômica; é sintetizado com um peptídeo sinal que o direciona ao lisossomo, onde exerce sua atividade catalítica.
• Requer ferro como cofator, tornando-o uma metaloenzima, e contém ligações dissulfeto e sítios de glicosilação importantes para sua estrutura e estabilidade.
• Expressão elevada de ACP5 é observada em condições patológicas, incluindo doença de Gaucher, doença de Hodgkin e várias leucemias (células pilosas, células B e células T), sugerindo seu potencial como biomarcador.
• A proteína foi caracterizada por sequenciamento direto de proteínas e determinação da estrutura 3D, confirmando sua identidade e fornecendo insights sobre sua função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 76-325 da ACP5 humana, que inclui o domínio catalítico; portanto, o anticorpo provavelmente detecta a forma madura da enzima. Considere validar em amostras que expressam osteoclastos ativos ou linhagens de células leucêmicas.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 37 kDa; no entanto, a glicosilação pode causar um deslocamento. Otimize a preparação da amostra e use controles apropriados.
• Para imuno-histoquímica (embebido em parafina, IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária; teste com métodos enzimáticos e induzidos por calor.
• Na imunofluorescência, a permeabilização é necessária para detectar a localização lisossômica; a coloração simultânea com marcadores lisossômicos pode confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos de translação; valide em seu sistema modelo específico.
• O desempenho do ELISA deve ser verificado com proteína recombinante ou amostras biológicas; considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção se estiver desenvolvendo um ensaio sanduíche.

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