Anticorpo Policlonal Anti-ADAM10 para WB, IF/ICC, FC, ELISA - O14672

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ADAM10

• A ADAM10, também conhecida como Kuzbanian ou CDw156, é um membro da família ADAM (a disintegrin and metalloprotease) e funciona como uma metaloprotease transmembranar envolvida no "shedding" (clivagem) do ectodomínio de diversos substratos.
• Cliva o precursor do fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa) ligado à membrana para libertar TNF solúvel, um passo crítico na sinalização inflamatória. Referências relacionadas: PMID:20592283
• A ADAM10 atua como a alfa-secretase para a proteína precursora amiloide (APP), reduzindo a produção de amiloide-beta e ligando-a à patologia da doença de Alzheimer. Referências relacionadas: PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• Também liberta outras moléculas de adesão e recetores, tais como CD44, caderinas, efrinas e ligandos Notch, regulando assim a adesão celular, migração e vias de sinalização do desenvolvimento.
• Subcelularmente, a ADAM10 localiza-se na membrana plasmática, aparelho de Golgi, vesículas revestidas por clatrina e junções celulares (junções aderentes), bem como em projeções neuronais como axónios e dendrites.
• A proteína sofre um processamento pós-traducional complexo, incluindo glicosilação, formação de pontes dissulfeto e clivagem do seu pró-domínio para gerar a protease ativa.
• A ADAM10 é amplamente expressa, com níveis elevados no cérebro, tecidos linfoides (baço, gânglios linfáticos, timo), medula óssea e cartilagem, consistente com os seus papéis na neurogénese e função imunitária. Referências relacionadas: PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 214–672 da ADAM10 humana, cobrindo domínios extracelulares chave; o anticorpo pode reconhecer tanto formas de comprimento total como clivadas.
• No Western blot, preveja uma banda principal perto de 84 kDa para a proteína de comprimento total; bandas adicionais podem aparecer devido ao "shedding" ou ativação. Otimize os controlos de carga e valide com os seus lisados de amostra específicos.
• Para imunofluorescência/ICC, teste condições de permeabilização e não permeabilização para comparar os padrões de coloração de superfície versus intracelular.
• Na citometria de fluxo, titule o anticorpo cuidadosamente e utilize controlos de isotipo para contabilizar o fundo (background), especialmente ao analisar células com expressão variável de ADAM10.
• Ao realizar ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo de captura específico para um epítopo diferente ou utilize ADAM10 recombinante como padrão para garantir a quantificação.
• Como este anticorpo reporta reatividade cruzada com ADAM10 de rato, verifique a reatividade nas suas amostras derivadas de rato; para outras espécies, consulte a homologia de sequência e realize testes piloto.

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