Anti-ADAM28 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - Q9UKQ2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ADAM28

• O ADAM28 (Proteína contendo domínio de desintegrina e metaloproteinase 28) é um membro da família ADAM, também conhecido como eMDC II (proteína semelhante a metaloproteinase epididimal, semelhante a desintegrina e rica em cisteína II) ou MDC-L. É codificado pelo gene ADAM28 (pseudônimos ADAM23, MDCL) e sofre splicing alternativo.
• Funciona como uma metaloprotease envolvida em eventos adesivos e proteolíticos durante a emigração de linfócitos. Pode mediar a clivagem de domínios ectoplasmáticos de proteínas de superfície de linfócitos, como FASL e CD40L, modulando assim as respostas imunes.
• O ADAM28 também pode desempenhar um papel na maturação dos espermatozoides, com base em sua expressão e contexto funcional.
• A localização subcelular inclui a membrana celular e a secreção, consistente com seus domínios transmembrana e secretados. A proteína contém um peptídeo sinal, pró-peptídeo, metaloprotease, desintegrina, rica em cisteína, semelhante a EGF e domínios transmembrana.
• Principais modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto e clivagem em um par de resíduos básicos para converter o zimogênio em uma protease ativa. Liga-se ao zinco como um cofator de metaloprotease.
• O ADAM28 é predominantemente expresso em tecidos linfoides secundários — linfonodo, baço, intestino delgado, estômago, cólon, apêndice e traqueia — sendo a população de linfócitos a fonte principal. O isoforma 2 mostra expressão preferencial no baço.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 199-440 do ADAM28 humano, que se encontra na região extracelular contendo domínios de protease, desintegrina e rica em cisteína. Este design pode reconhecer tanto as formas ligadas à membrana quanto as secretadas da proteína.
• Para Western blot, considere o uso de lisados de tecidos linfoides humanos (por exemplo, linfonodo, baço) ou linfócitos cultivados, pois estes são locais de expressão conhecidos. A reatividade cruzada com camundongo deve ser validada com controles de tecido ou linhagem celular apropriados.
• O preparo de amostras para SDS-PAGE pode exigir condições redutoras para resolver estruturas ligadas por dissulfeto; o peso molecular previsto para a proteína completa é de ~87 kDa, embora fragmentos possam ser observados devido ao processamento do zimogênio.
• Em aplicações de ELISA, avalie a detecção de ADAM28 solúvel em fluidos biológicos ou sobrenadantes de células, pois a proteína pode ser secretada. Inclua proteína recombinante ou controles positivos conhecidos para otimização do ensaio.

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