Anticorpo Policlonal Anti-ADAMTS5 para WB, ELISA - Q9UNA0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ADAMTS5

• O ADAMTS5, também conhecido como aggrecanase-2, ADAM-TS 11 ou ADMP-2, é uma metaloproteinase secretada pertencente à família ADAMTS de proteases extracelulares.
• O ADAMTS5 funciona como uma enzima degradadora da matriz extracelular (ECM) que mostra atividade proteolítica em direção aos proteoglicanos de sulfato de condroitina hialectanos (CSPGs), incluindo ACAN, VCAN, BCAN e NCAN, desempenhando um papel fundamental na renovação da cartilagem e na remodelação do tecido conjuntivo. Referências relacionadas: PMID:16133547 PMID:18992360
• A proteína localiza-se no espaço extracelular e na matriz extracelular, onde remodela os ambientes pericelulares durante o desenvolvimento e a manutenção dos tecidos.
• O ADAMTS5 contém domínios de metaloprotease, dissintegrina e repetições do tipo 1 de trombospondina; a atividade catalítica requer a ligação de zinco e a enzima é inicialmente produzida como um zimogênio.
• A expressão tecidual é detectada em níveis baixos na placenta, coração, cérebro, colo do útero, útero, bexiga, esôfago e cartilagem, com abundância aumentada nas cápsulas articulares artríticas.
• Através da clivagem da versicana, o ADAMTS5 contribui para a morfogênese cardíaca e dos membros embrionários e facilita a fusão de mioblastos durante o desenvolvimento e regeneração do músculo esquelético.
• O ADAMTS5 também participa na migração de linfócitos T a partir dos linfonodos drenantes após a infecção viral.
• A proteína está sujeita à clivagem em pares de resíduos básicos e contém múltiplas ligações dissulfeto e sítios de glicosilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético dentro dos aminoácidos 601–700 do ADAMTS5 humano (NP_008969.2). Ao projetar estratégias de detecção, verifique se a sequência alvo é conservada na sua espécie de interesse, pois a reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 101 kDa. Otimize a porcentagem do gel (por exemplo, 8–10% de poliacrilamida) e as condições de transferência para garantir um blotting eficiente desta proteína relativamente grande. Inclua um lisado de controle positivo de tecido de placenta ou cartilagem.
• Como este é um anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplos epítopos; confirme a especificidade por detecção paralela com um método independente (por exemplo, knockdown por siRNA ou competição de antígeno), se necessário.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo de detecção adequado e considere o uso de ADAMTS5 recombinante ou extratos de tecido como antígeno de captura. Titule o anticorpo para determinar uma concentração de trabalho ideal.
• Embora o anticorpo seja validado para WB e ELISA pelo fabricante, o desempenho em outras aplicações (por exemplo, IHC, IF) deve ser testado empiricamente nas condições relevantes de amostra e tampão.

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