Anticorpo Monoclonal Anti-Adenilato Quinase 4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27144

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Adenilato Quinase 4

• A Adenilato quinase 4 (AK4) é uma nucleosídeo fosfato quinase mitocondrial de ampla especificidade que mantém a homeostase nucleotídica celular ao catalisar as interconversões de nucleosídeo-fosfato. Referências relacionadas: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• A AK4 fosforila preferencialmente o AMP em ADP usando ATP como doador de fosfato; quando usa GTP, ela fosforila exclusivamente o AMP. Referências relacionadas: PMID:19766732
• In vitro, a AK4 também pode fosforilar CMP, dAMP e dCMP e usar GTP como um doador de fosfato alternativo. Referências relacionadas: PMID:19766732 PMID:23416111
• A AK4 exibe atividade de difosfato quinase, gerando vários nucleosídeos trifosfatos (ATP, CTP, GTP, UTP, TTP, dATP, dCTP, dGTP) a partir de seus substratos difosfato. Referências relacionadas: PMID:23416111
• A AK4 está localizada na matriz mitocondrial.
• A AK4 apresenta alta expressão no rim, moderada no coração e fígado, e baixa no cérebro.
• A AK4 protege as células do estresse oxidativo e modula a detecção de energia celular ao controlar a fosforilação da AMPK. Referências relacionadas: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:24767988 PMID:26980435

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que cobre os aminoácidos 1–100 da AK4 humana, uma região N-terminal provavelmente exposta na proteína nativa; esse design suporta aplicações como IF/ICC, onde a conformação nativa pode ser crítica.
• Para western blot (WB), use condições redutoras para resolver a proteína em ~25 kDa. Considere validar a especificidade em lisados de humano e rato, pois a reatividade cruzada com rato é relatada.
• Recomenda-se a otimização da diluição do anticorpo, da recuperação do antígeno e das condições de bloqueio para IHC-P e IF/ICC, pois o desempenho pode variar conforme o tipo de amostra e a fixação.
• No ELISA, titule o antígeno de revestimento e os anticorpos de detecção para obter relações sinal-ruído ideais; a reatividade do anticorpo com um imunógeno de peptídeo linear sugere adequação para formatos de ELISA direto e sanduíche.

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