Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-AGL (GDE) para WB, IF/ICC, ELISA - P35573

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AGL

• A AGL, também conhecida como enzima desramificante de glicogênio (GDE), é codificada pelo gene AGL e pertence à família das hidrolases de glicosídeo, combinando atividades de glicosidase e glicosiltransferase.
• Ela atua como uma enzima multifuncional na degradação do glicogênio, possuindo os domínios 4-alfa-glucanotransferase e amilo-1,6-glicosidase que trabalham sequencialmente.
• A enzima é essencial para a quebra completa do glicogênio, transferindo uma cadeia curta de oligossacarídeo e depois clivando a glicose alfa-1,6-ligada restante nos pontos de ramificação.
• A AGL se localiza no citoplasma, o que é consistente com seu papel no metabolismo do glicogênio citosólico e sua interação com as partículas de glicogênio.
• Múltiplas isoformas são produzidas por splicing alternativo, com expressão tecido-específica: a isoforma 1 predomina no fígado, rim e células linfoblastóides; as isoformas 2, 3 e 4 estão presentes adicionalmente no músculo e coração; as isoformas 5 e 6 são encontradas tanto no fígado quanto no músculo.
• Mutações no gene AGL causam a doença de armazenamento de glicogênio tipo III (doença de Cori), destacando seu papel crítico na homeostase do glicogênio.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação, conforme evidenciado por estudos de proteômica, o que pode regular a atividade ou estabilidade da enzima.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para os aminoácidos 1-100 da AGL humana (P35573). Esta região N-terminal pode apresentar alta conservação entre humano, camundongo e rato, o que é consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 175 kDa; no entanto, o splicing alternativo pode gerar bandas adicionais correspondentes às isoformas tecido-específicas.
• Ao realizar imunofluorescência (IF/ICC), é esperada coloração citoplasmática, e métodos adequados de permeabilização e fixação devem ser otimizados.
• Para aplicações em ELISA, o anticorpo pode ser utilizado em configurações diretas ou de captura/detecção; experimentos de diluição em série são recomendados para determinar as concentrações de trabalho ideais.
• Considere validar o desempenho do anticorpo no seu sistema de amostra específico, pois os níveis de expressão e a prevalência de isoformas podem variar entre tipos celulares e tecidos.

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