Anticorpo Policlonais Anti-AIRE para WB, IF/ICC, ELISA - O43918

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AIRE

• AIRE (Autoimmune regulator), também conhecido como proteína APECED, é um fator de transcrição essencial para o estabelecimento da autotolerância imunológica. Mutações no gene AIRE causam a distrofia autoimune poliendócrina candidíase ectodérmica (APECED).
• O AIRE promove a autotolerância no timo ao regular a expressão de antígenos restritos a tecidos (TRAs) nas células epiteliais tímicas medulares (mTECs). Referências relacionadas: PMID:26084028
• Ele se liga a doubletes de G em regiões de DNA ricas em A/T, interage com nucleossomos e reconhece seletivamente a histona H3 que não apresenta metilação na Lisina-4, fosforilação na Treonina-3 e metilação na Arginina-2, atuando assim como um sensor epigenético.
• O AIRE induz a expressão de milhares de TRAs, que são apresentados nas moléculas MHC-I e MHC-II para as células T em desenvolvimento, reforçando a tolerância central. Referências relacionadas: PMID:26084028
• Em órgãos linfoides secundários, uma população distinta de células extratímicas derivadas da medula óssea que expressam AIRE (eTACs) contribui para a tolerância periférica ao induzir a inativação funcional das células CD4+. Referências relacionadas: PMID:23993652
• A localização subcelular é principalmente nuclear, com presença adicional no citoplasma.
• O AIRE contém domínios de dedo de zinco, sofre splicing alternativo (as isoformas 2 e 3 são expressas com menos frequência) e é regulado por fosforilação. Diversas variantes associadas a doenças já foram identificadas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno tem como alvo a região N-terminal (aminoácidos 30–130); verifique a acessibilidade do epítopo e considere potenciais efeitos de bloqueio se o seu ensaio envolver esse domínio.
• Para Western blotting, o AIRE endógeno corre aproximadamente a 58 kDa; use controles positivos derivados do timo ou de mTECs e inclua a validação da expressão tecido-específica.
• Em aplicações IF/ICC, otimize os protocolos de fixação e permeabilização para detectar tanto as frações nucleares quanto citoplasmáticas. Valide a coloração em tecido tímico ou linhas celulares relevantes.
• Para ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado para captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal pode melhorar a especificidade em formatos sanduíche.

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