Anticorpo Policlonal Anti-AK2 para WB e ELISA - P54819

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AK2

• A adenilato quinase 2 (AK2), também conhecida como ATP-AMP transfosforilase 2, é uma enzima mitocondrial que catalisa a transferência reversível do grupo fosfato terminal entre ATP e AMP, produzindo duas moléculas de ADP. Esta reação é central para a homeostase energética celular e o metabolismo de nucleotídeos de adenina.
• A atividade da adenilato quinase é crítica para regular a utilização de fosfato e as vias de biossíntese de AMP de novo, ajudando a manter o equilíbrio apropriado de nucleotídeos de adenina dentro da célula.
• O AK2 desempenha um papel fundamental na hematopoiese, o processo de formação de células sanguíneas, indicando a sua importância na função e diferenciação de células-tronco hematopoiéticas.
• A proteína localiza-se no espaço intermembranar mitocondrial, onde participa na manutenção do pool de nucleotídeos de adenina mitocondriais e na transferência de energia entre as mitocôndrias e o citosol.
• O AK2 é expresso de forma ubíqua, com níveis elevados no coração, fígado e rim, e níveis mais baixos no cérebro, músculo esquelético e pele. Notavelmente, está presente em trombócitos, mas ausente em eritrócitos, que carecem de mitocôndrias. Em leucócitos, o AK2 é prontamente detectável, enquanto a isoforma citosólica AK1 está maioritariamente ausente, sugerindo a suscetibilidade dos leucócitos à deficiência de AK2.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e a proteína contém ligações dissulfeto e um local de ligação de ATP. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas. Mutações no gene AK2 estão associadas à displasia reticular, uma forma grave de imunodeficiência combinada grave (SCID).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que abrange a sequência completa (aminoácidos 1-232) do AK2 humano. Este design pode permitir que o anticorpo reconheça a estrutura nativa do AK2 em vários ensaios. Para Western blotting, considere o uso de lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas ou de camundongo conhecidas por expressar AK2, como HeLa ou HEK293, e verifique a banda em ~26 kDa.
• Para aplicações de ELISA, o imunógeno recombinante pode servir como controle positivo. A otimização das condições de revestimento e da diluição do anticorpo pode ser necessária.
• Embora tenha sido demonstrado que o anticorpo reage cruzadamente com AK2 humano e de camundongo, a reatividade com outras espécies ou isoformas deve ser validada no sistema experimental relevante.

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