Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-AKAP8 para WB, IF/ICC, ELISA - O43823

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AKAP8

• O AKAP8, também conhecido como AKAP95, é uma proteína âncora da quinase A que compartimentaliza a proteína quinase dependente de cAMP (PKA tipo II) em locais subcelulares específicos, facilitando a sinalização precisa (PubMed:9473338). Referências relacionadas: PMID:9473338
• Atua como um andaime para a PKA nos cromossomos mitóticos, recrutando a subunidade NCAPD2 do complexo condensina para manter a condensação cromossômica durante a mitose independentemente da ancoragem da PKA (PubMed:10601332, PubMed:10791967, PubMed:11964380). Referências relacionadas: PMID:10601332, PMID:10791967, PMID:11964380
• O AKAP8 está envolvido na regulação do ciclo celular, facilitando a entrega das ciclinas D/E ao CDK4, e é necessário para a transição G2/M e para a desacetilação de histonas mitótica via recrutamento da HDAC3 (PubMed:14641107, PubMed:16980585). Referências relacionadas: PMID:14641107, PMID:16980585
• Modula a sinalização do receptor Toll-like, suprimindo a produção de TNF na ativação precoce de macrófagos induzida por LPS via direcionamento da PKA para o NFKB1 (Por similaridade).
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos celulares, incluindo núcleo, nucléolo, matriz nuclear e citoplasma, permitindo funções dependentes do contexto, como remodelação da cromatina, regulação transcricional e transdução de sinal.
• O AKAP8 se liga preferencialmente a DNA rico em GC e se associa à cromatina do RNA ribossômico (rRNA), sugerindo um papel na regulação da transcrição do rDNA (PubMed:26683827). Referências relacionadas: PMID:26683827
• Altamente expresso em coração, fígado, músculo esquelético, rim, pâncreas e células dendríticas maduras, refletindo sua ampla relevância fisiológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 480–692 do AKAP8 humano, uma região que inclui os domínios de dedo de zinco C-terminal; considere que o anticorpo pode reconhecer epítopos dentro desta região funcionalmente relevante de ligação ao DNA.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda específica em aproximadamente 76 kDa; use lisados enriquecidos com núcleo de células humanas ou de camundongo (ex: HeLa, HEK293, NIH/3T3) como controles positivos e valide com marcadores de peso molecular.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), espere coloração nuclear pontilhada com possível localização nucleolar e citoplasmática; a co-coloração com marcadores nucleares (ex: DAPI, lamina) é recomendada para confirmação.
• Para ELISA, protocolos diretos ou sanduíche padrão podem ser aplicados; otimize a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo usando proteína ou peptídeo recombinante de AKAP8.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo, este anticorpo é adequado para estudos entre espécies; sempre confirme a especificidade por meio de controles de knockdown ou knockout para garantir dados confiáveis.

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