Anti-AKT1 (fosfo T308) mAb de Coelho para WB, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AKT1

• A AKT1 é umembro da família de quinases serina/treonina AKT, que também inclui AKT2 e AKT3, e regula processos celulares críticos como metabolismo, proliferação, sobrevivência, crescimento e angiogênese (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Referências relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• A AKT1 promove a sobrevivência celular ao fosforilar MAP3K5 em Ser-83, o que inibe a atividade da quinase MAP3K5 em resposta ao estresse oxidativo, prevenindo assim a apoptose (PubMed:11154276). Referências relacionadas: PMID:11154276
• Na sinalização da insulina, a AKT1 medeia a síntese proteica e o crescimento celular ao fosforilar TSC2 em Ser-939 e Thr-1462, levando à ativação da via mTORC1 (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Referências relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• A AKT1 fosforila fatores de transcrição FOXO, incluindo FOXO1 em Thr-24, Ser-256 e Ser-319, induzindo a ligação de proteínas 14-3-3 e a retenção citoplasmática, inibindo assim suas funções pró-apoptóticas (PubMed:10358075). Referências relacionadas: PMID:10358075
• A proteína localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, refletindo seus papéis regulatórios multifacetados.
• A AKT1 é expressa em todos os tipos de células humanas, com expressão aumentada observada no câncer de próstata e fosforilação elevada de Tyr-176 em estágios progressivos de câncer de mama.
• A fosforilação em Thr308 é um evento crítico para a ativação da quinase AKT1 e serve como um marcador chave da atividade da via PI3K em aplicações de pesquisa e diagnóstico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor de Thr308 da AKT1 humana; valide a especificidade comparando sinais com e sem tratamento com fosfatase.
• Para Western blot, espera-se uma banda principal em ~56 kDa; use inibidores frescos de proteases e fosfatases durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação.
• Considere o uso do anticorpo em ELISA para quantificar os níveis de fosforilação de AKT1 em Thr308; o emparelhamento com um anticorpo total de AKT1 permite a normalização.
• Otimize a diluição do anticorpo para cada aplicação e linhagem celular para obter a melhor relação sinal-ruído.

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