Anticorpo Policlonal Anti-AKT1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AKT1

• O AKT1 é uma serina/treonina-proteína quinase, também conhecida como Proteína quinase B (PKB), pertencente à família de quinases AKT (AKT1, AKT2, AKT3). Regula diversos processos, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese. Referências relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• O AKT1 media os efeitos de fatores de crescimento, como insulina, IGF-1 e EGF, a jusante da PI3K, controlando a captação de glicose via translocação de GLUT4 e a síntese de glicogênio através da inibição de GSK3. Referências relacionadas: PMID:11994271
• Promove a sobrevivência celular ao fosforilar e inibir fatores pró-apoptóticos como BAD e MAP3K5, e ao ativar vias de sobrevivência, incluindo NF-κB e CREB1. Referências relacionadas: PMID:11154276 PMID:9829964
• O AKT1 localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, refletindo seu envolvimento em múltiplos compartimentos de sinalização.
• O AKT1 sofre modificações pós-traducionais importantes, como fosforilação e acetilação, e é considerado um proto-oncogene. Sua expressão é frequentemente regulada positivamente em cânceres, com a forma fosforilada na Tyr-176 aumentando durante a progressão do câncer de mama.
• Expresso de forma ubíqua em células humanas, o AKT1 desempenha um papel crítico no crescimento e diferenciação celular. A regulação positiva específica de tecido é observada em malignidades da próstata e da mama.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um péptido dentro da região C-terminal (aa 350–480) do AKT1 humano, o que pode conferir especificidade de isoforma; no entanto, valide com proteínas recombinantes ou siRNA se a reatividade cruzada com AKT2 ou AKT3 for uma preocupação.
• Para Western blotting, condições desnaturantes e redutoras geralmente revelam uma banda em ~56 kDa. Use controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa, MCF-7) e considere que a mobilidade observada pode refletir o estado de fosforilação.
• Os protocolos de IF/ICC e IHC-P podem requerer permeabilização e recuperação antigénica, respectivamente. Otimize os métodos de fixação (por exemplo, PFA 4% vs. metanol) para o seu tipo de amostra e inclua etapas de bloqueio para minimizar o fundo.
• Aplicações de ELISA podem ser configuradas usando formatos indiretos ou sanduíche; emparelhar com um anticorpo de captura adequado pode aumentar a sensibilidade. Titular o anticorpo e usar um tampão de revestimento consistente.
• É relatada reatividade cruzada com AKT1 de camundongo e rato, mas verifique a homologia de sequência específica da espécie na região do imunógeno se estiver usando amostras não humanas.

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