Anticorpo Policlonais Anti-AKT1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AKT1

• AKT1 (PKB/PKB alfa/RAC-PK-alfa) é uma serina/treonina-proteína quinase e uma das três isoformas de AKT intimamente relacionadas (AKT1, AKT2, AKT3) que regulam processos celulares fundamentais, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência, crescimento e angiogênese. Referências relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 fosforila uma ampla gama de substratos para controlar a sinalização da insulina, metabolismo da glicose e crescimento celular. Ele fosforila TSC2, ativando mTORC1 para promover a síntese de proteínas e o crescimento celular, e fosforila os fatores de transcrição FOXO, resultando em seu sequestro citoplasmático e inibição da expressão de genes pró-apoptóticos. Referências relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:10358075, PMID:21432781
• AKT1 é fundamental para a sobrevivência celular: ele fosforila MAP3K5/ASK1 na Ser-83 para inibir a apoptose induzida por estresse oxidativo e fosforila BAD para bloquear sua função pró-apoptótica. Ele também ativa CREB1, aumentando a transcrição de genes anti-apoptóticos como BCL2 e MCL1. Referências relacionadas: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 desempenha um papel fundamental na captação de glicose mediada pela insulina, promovendo a translocação do transportador SLC2A4/GLUT4 para a membrana plasmática e inibindo GSK3, estimulando assim a síntese de glicogênio.
• AKT1 se localiza no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranas mitocondrial, permitindo modular a sinalização em múltiplos locais subcelulares.
• Expresso ubiquitariamente nos tecidos humanos, os níveis proteicos de AKT1 aumentam do estado normal para o maligno no câncer de próstata, e sua forma fosforilada em Tyr-176 está elevada durante a progressão do câncer de mama.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 100-200, uma região central que pode oferecer boa acessibilidade. Considere este anticorpo para detectar a proteína AKT1 total em vários lisados.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 56 kDa. Espera-se uma banda nesse tamanho em amostras humanas, de camundongo e de rato, dada a reatividade cruzada relatada. Verifique o marcador de peso molecular e use controles de carregamento adequados.
• Este anticorpo policlonal é adequado para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC). Otimize os métodos de recuperação de antígeno para tecidos emblocados em parafina e inclua controles negativos adequados para avaliar a especificidade.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Valide a concentração de trabalho ideal empiricamente usando o peptídeo imunogênico como controle positivo.
• Como a ativação do AKT1 depende do status de fosforilação (por exemplo, Thr-308, Ser-473), considere combinar com anticorpos específicos para a forma ativada em estudos de sinalização.
• Devido à semelhança de sequência entre as isoformas de AKT, verifique a especificidade da isoforma no seu sistema experimental.

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