Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ALIX para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8WUM4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ALIX

• O ALIX (proteína interativa 6 de morte celular programada), também conhecido como AIP1, HP95, DRIP4 e MCPH29, é codificado pelo gene PDCD6IP e existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• É uma proteína VPS de classe E essencial para a biogênese de corpos multivesiculares (MVB), concentrando e classificando carga para a formação de vesículas intraluminais via via ESCRT. Referências relacionadas: PMID:14739459
• O ALIX liga-se ao fosfolipídeo ácido lisobisfosfatídico (LBPA) nas membranas internas dos MVB e serve como adaptador para um subconjunto de proteínas ESCRT-III, como a CHMP4B.
• A proteína é necessária para a citocinese, funcionando na etapa de abscisão por meio de eventos de fissura de membrana topologicamente equivalentes. Referências relacionadas: PMID:17556548 PMID:17853893 PMID:18641129
• Em conjunto com SDC1/4 e SDCBP, o ALIX regula a biogênese de exossomos, impactando a comunicação intercelular. Referências relacionadas: PMID:22660413
• Subcelularmente, o ALIX localiza-se no citosol, melanossomos, centríolos, junções de oclusão, anel do corpo intermediário e é secretado em exossomos extracelulares.
• Participa de interações hospedeiro-vírus, facilitando o brotamento do HIV-1 ao interagir com a CHMP4B, e pode desempenhar papéis na apoptose e na manutenção da barreira epitelial.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e metilação, influenciando suas atividades multifuncionais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo é proteína recombinante; considere que o anticorpo pode reconhecer tanto o ALIX nativo quanto o desnaturado, dependendo da aplicação.
• Para Western blot (WB), valide em seu sistema específico de amostra e otimize o carregamento de proteína para detectar a banda de 96 kDa; note que modificações pós-traducionais podem causar leves deslocamentos de mobilidade.
• Em experimentos de IF/ICC, os métodos de fixação e permeabilização podem afetar a coloração de diferentes pools de ALIX (citossólico, centrossomal, corpo intermediário); considere testar múltiplos protocolos.
• Para IP, confirme a compatibilidade do anticorpo com seu tampão de lise e garanta o enriquecimento do alvo executando controles paralelos.
• Ao usar ELISA, inclua controles positivos (proteína recombinante) e negativos apropriados para avaliar sensibilidade e especificidade.

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