Anticorpo Policlonal Anti-ALK para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UM73

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do ALK

• O ALK (quinase de tirosina do linfoma anaplásico, também conhecido como CD246 ou ALK1) é um receptor de tirosina quinase neuronal que é essencial e transitoriamente expresso em regiões específicas dos sistemas nervosos central e periférico, onde desempenha um papel crucial na génese e diferenciação do sistema nervoso.
  Referências relacionadas: PMID:11121404, PMID:11387242, PMID:16317043
• O ALK atua como uma proteína chave da magreza: nos neurónios hipotalâmicos, controla o dispêndio de energia regulando negativamente a lipólise do tecido adiposo branco e o tom simpático para afinar a homeostase energética (Por similaridade).
• Após a ligação do ligando (especialmente ALKAL2), o ALK dimeriza e sofre autofosforilação no seu domínio quinase intracelular, desencadeando a ativação a jusante da via da proteína quinase ativada por mitogénio (MAPK) e outras cascatas de sinalização.
  Referências relacionadas: PMID:30061385, PMID:33411331, PMID:34646012, PMID:34819673
• O ALK recruta e fosforila as proteínas adaptadoras IRS1, SHC1, FRS2 e CBL, levando à ativação de NF-kappa-B e da serina/treonina quinase AKT, que promove a sobrevivência e proliferação celular.
  Referências relacionadas: PMID:15226403, PMID:16878150, PMID:12122009
• O ALK localiza-se na membrana celular (anotação UniProt) e é expresso no cérebro, sistema nervoso central, intestino delgado e testículos, mas não em células linfoides normais.
• O ALK é classificado como um proto-oncogene e está associado a reorganizações cromossómicas no cancro. É uma glicoproteína com uma única hélice transmembranar e um domínio de tirosina quinase intracelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos resíduos 1521–1620 perto do terminal C do ALK humano (NP_004295.2). Para o Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 176 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados e valide com uma linha celular ou lisado de tecido conhecido como positivo para ALK.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de fixação e permeabilização para detetar o ALK localizado na membrana; considere o uso de linhas celulares com expressão confirmada de ALK.
• Em aplicações ELISA, a natureza policlonal pode fornecer uma ampla cobertura de epítopos, mas as condições do ensaio e os métodos de revestimento devem ser determinados experimentalmente.
• Ao usar amostras de rato, confirme a homologia da sequência da região do imunogénio, pois a reatividade cruzada é declarada, mas o desempenho do anticorpo pode variar.
• Como com qualquer anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade de lote para lote; recomenda-se a inclusão de controlos positivos e negativos adequados para cada experiência.

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